[发明专利]一种库尔勒香梨果实石细胞中磨木木质素提取的方法

摘要

本申请涉及一种库尔勒香梨果实石细胞中磨木木质素提取的方法，包括预处理、除汁、分离、干燥、粗木质素提取、磨木木质素提纯，将粗制木质素溶解于吡啶‑冰醋酸‑水混合溶液中；溶解后加入三氯甲烷静置萃取，分离出三氯甲烷层；并在40~45℃条件下真空干燥浓缩到原来体积的1/10；浓缩后的溶液中加入乙醚，离心分离出白色沉淀，移至常温培养皿中逐渐变为棕黄色胶状物；使用烘箱烘干沉淀物，最终获得棕黄色粉状物为MWL，保存备用。本发明对现有的MWL提取及其碱性硝基苯氧化产物的检测方法进行了改进，明确了MWL的提取率，香梨果肉中MWL提取率为6‰；使用安捷伦1260型高效液相色谱仪检测，提高了主要六种物质的检测精度；资源综合利用率高，明确了MWL提取工艺参数。

主权项

一种库尔勒香梨果实石细胞中磨木木质素提取的方法，其特征在于：其包括如下操作步骤：步骤一、预处理：将香梨果实去皮去心室后，手工使用刀片取香梨果实胴部果肉；将果肉切成约1.0 cm3块，装于保鲜袋中在‑20℃冰柜中冷冻12 h；步骤二、除汁：样品解冻后，使用搅拌机（HR1724，PHILIPS滤网200目）去除大量果汁后，加入400ml蒸馏水于果渣（主要是石细胞）中，继续倾倒洗液，重复4次，最后将果渣倒出；滤除果汁，滤网(孔径74 μm，200目)保留搅拌破碎的果渣组织；步骤三、分离：使用均质机（T10，IKA，转速20000~30000 rap/min、破碎率80%、悬浮颗粒直径5~10 μm）匀浆3~5 min，使石细胞充分与果肉分离；将匀浆液3000 rap/min离心8~12 min，沉淀物主要是石细胞；步骤四、干燥：将石细胞从离心杯中取出，置烘箱中60～65℃烘至恒重，取出放置到干燥器中冷却至室温；收集石细胞，称量，精确到1 mg；步骤五、粗木质素提取：取一定量石细胞机器研磨过200目筛；取10 g石细胞粉末使用苯‑乙醇(2:1，V/V)浸提12 h，料液比为1:10；将浸提液用抽滤装置过滤分离，取滤渣在静置状态下用二氧六环‑水浸提，25~45℃，料液比1:8~14，提取36~72 h，滤出抽提液；将上述抽提液用旋转蒸发仪在40~45℃条件下浓缩，真空压为0.075 MPa~0.085 MPa得粗制木质素；步骤六、磨木木质素提纯：将粗制木质素溶解于吡啶‑冰醋酸‑水(9:1:4，V/V)混合溶液中；溶解后加入15倍体积三氯甲烷静置萃取，分离出三氯甲烷层（下层为三氯甲烷层）；并在40~45℃条件下真空干燥浓缩到原来体积的1/10，仪器工作参数为：30~35 min，转速40 rap/min,温度35~40℃，真空压为0.080~0.085 MPa；浓缩后的溶液中加入5倍体积乙醚，3000 rap/min，10~15 min离心分离出白色沉淀，移至常温培养皿中逐渐变为棕黄色胶状物；使用烘箱烘干沉淀物；称重精确到1.0 mg；最终获得棕黄色粉状物为MWL，保存备用。