[发明专利]一种用于大肠杆菌‑鸭疫里默氏杆菌的高效穿梭质粒在审
申请号: | 201611038010.X | 申请日: | 2016-11-23 |
公开(公告)号: | CN106497960A | 公开(公告)日: | 2017-03-15 |
发明(设计)人: | 刘马峰;冯言;王梦怡;朱德康;程安春;汪铭书;贾仁勇;陈舜;孙昆峰;杨乔;吴英 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司11275 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明涉及一种用于大肠杆菌‑鸭疫里默氏杆菌的高效穿梭质粒、制备方法及其应用,穿梭质粒的基因序列如SEQ ID NO.1所示,是在质粒pPM5的基础上进行改造的,先将鸭疫里默氏杆菌复制起始基因(pRA0726 ori)克隆到此质粒中,然后将转移位点(oriT)克隆到上述质粒中,使此穿梭质粒能够通过高效的结合转移导入鸭疫里默氏杆菌中,且能稳定的复制。为了方便基因片段插入穿梭质粒上且提高基因的表达量,将在穿梭质粒上克隆一段带有多个内切酶位点的高表达启动子序列(High EXP)。本发明所得穿梭质粒可以在鸭疫里默氏杆菌中稳定存在,用于基因敲除株的回补。质粒较小且具有多个多克隆位点,易于操作。结合转移效率非常高。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 大肠杆菌 鸭疫里默氏 杆菌 高效 穿梭 质粒 | ||
【主权项】:
一种用于大肠杆菌‑鸭疫里默氏杆菌的高效穿梭质粒,其特征在于,其基因序列如SEQ ID NO.1所示。
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