[发明专利]一种巴东缬草一次成苗的方法

摘要

本发明涉及一种巴东缬草一次成苗的方法，含有以下步骤：a.培养基的配置；b.外植体的选取及灭菌；c.外植体的接种；d.培养：e.移栽炼苗。本发明方便快捷，与传统的方法选取地下根茎进行组织培养相比，选取巴东缬草幼嫩叶片作为外植体进行组织培养，不仅取材容易、不损毁巴东缬草根茎产生的经济效益，而且因为巴东缬草的叶片量大、繁殖系数更高，使得生产方法方便快捷，能在较短的时间内培育出巴东缬草的组培苗；且该方法操作简便，从外植体到幼苗只需要一个步骤，大大减少了人工作业，最大限度的降低了污染的发生；并且通过选择优良的母本来进行巴东缬草种质提纯复壮和优良性状的保持，对于巴东缬草的优良种苗繁育具有较高的应用价值。

主权项

1.一种巴东缬草一次成苗的方法，其特征在于含有以下步骤：a.培养基的配置：在MS基本培养基中加入6-BA和2,4-D，并使其浓度分别达到2mg/L和0.5mg/L，调节pH为5.8～6.0，121℃灭菌20min后，在超净工作台上分装至培养瓶中，培养基厚2-3cm；b.外植体的选取及灭菌：选取长势良好，生长健壮的巴东缬草植株，摘取未完全展开或刚展开的幼嫩叶片作外植体，用流动的自来水冲洗1～3分钟，去除尘土杂质，然后用0.5％洗衣粉水浸泡6～8分钟，用自来水冲洗干净，再用75％乙醇浸泡20s，无菌水冲洗四次，投入0.1％升汞中消毒8～10min，最后用无菌水冲洗5～8次，用灭菌的剪刀在无菌条件下剪成1cm2外植体材料；c.外植体的接种：在超净工作台上将外植体接种在培养瓶的培养基中，并使叶背面朝上，每个培养瓶接种3～4块，盖好瓶盖；d.培养：将接种后的培养瓶放在培养室中培养，培养室温度23～27℃，相对湿度70％～80％，在16h:8h的光暗周期的条件下培养；e.移栽炼苗：培养90天后，将4cm以上的大苗移出培养瓶，并用清水清洗干净根部培养基，种植在泥炭土营养土中炼苗，移栽后7天及时浇水保持土壤湿度，并遮阴，苗成活后即可撤去荫棚，并适当干燥蹲苗，培育壮苗。