[发明专利]一种离体体液中蛋白质的预处理方法在审
| 申请号： | 201611043619.6 | 申请日： | 2016-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN108088727A | 公开（公告）日： | 2018-05-29 |
| 发明（设计）人： | 张丽华;袁辉明;随志刚;杨开广;张玉奎 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | G01N1/34 | 分类号： | G01N1/34;G01N30/02 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种离体体液中蛋白质的预处理方法，通过一定比例的高分子聚合物溶液在低温条件下从离体体液(血液和尿液等)中提取出蛋白质，加入一定浓度的表面活性剂和蛋白质还原剂在高温条件下使蛋白质快速变性，加入可与蛋白质巯基快速反应的固相烷基化试剂，该试剂可选择性与蛋白质上的巯基反应，离心后，反复清洗固相颗粒表面去除其它干扰小分子(如糖、盐、表面活性剂、脂类等)，获得高纯度的蛋白质，最后加入蛋白酶将体液蛋白质酶解成肽段后，离心后获得的产物可直接采用液相色谱‑质谱系统进行分析。与传统的体液蛋白质预处理方法相比，该方法具有操作简单、重复性好、预处理通量高等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白质 体液 预处理 离体 表面活性剂 高分子聚合物溶液 蛋白质预处理 固相颗粒表面 蛋白酶 蛋白质酶解 蛋白质巯基 烷基化试剂 低温条件 反复清洗 高温条件 快速反应 液相色谱 质谱系统 传统的 高纯度 还原剂 小分子 变性 成肽 尿液 去除 通量 脂类 巯基 血液 分析 | ||
【主权项】：
1.一种离体体液中蛋白质的预处理方法，其特征在于：1)在离体血液和/或尿液中加入高分子聚合物溶液在低温条件下提取体液蛋白质；2)加入表面活性剂和蛋白质还原剂在高温条件下使蛋白质快速变性；3)再加入可与蛋白质巯基反应的固相烷基化试剂使体液蛋白质得到分离，获得体液蛋白质，最后加入蛋白酶将体液蛋白质酶解成肽段。
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