[发明专利]多菌种联合发酵生产苯丙氨酸

摘要

本发明公开了一种利用多菌种联合发酵生产苯丙氨酸的方法，包含的生产步骤有：混合培养基的制备、产氨短杆菌发酵、深红酵母发酵、苯丙氨酸放罐提纯。通过多菌种的联合发酵工艺发酵产生苯丙氨酸，解决了单菌种发酵酶活不高且在高氨高pH条件下容易失活的缺点。通过产氨短杆菌发酵尿素产生的氨作为氨源，再添加反式肉桂酸和深红酵母，在利于酵母发酵的低温条件下，通过酵母产生的苯丙氨酸解氨酶发酵反式肉桂酸和氨产生苯丙氨酸。发酵全程不添加氨水和碳酸氢铵，不造成环境污染，且产物后提取工艺较现有技术简单易行。

主权项

多菌种联合发酵生产苯丙氨酸，其特征在于，包含有如下步骤：（1）混合培养基的制备：将大麦芽除杂，除去秸秆和杂草，再用粉碎机粉碎成细小颗粒状，以质量体积比为1:4（KG/L）的比例加入纯水，放入水浴锅中65℃保温糖化7小时并不断搅拌，以保证糖化均匀；使用4层纱布过滤除杂，将糖化液煮沸加入适量鸡蛋白作为吸附助滤剂，待冷却后，再用4层纱布过滤，即得到澄清的麦芽汁，再加入2%尿素、0.2%硫酸镁、2%葡萄糖既得到混合培养基；（2）产氨短杆菌发酵：将产氨短杆菌按照1%‑1.5%的接种量接入混合培养基中，于发酵罐内进行搅拌发酵；（3）深红酵母发酵：将发酵液内加入2%反式肉桂酸，再接入深红酵母进行发酵；（4）苯丙氨酸放罐提纯：将发酵罐内温度升至121℃，杀菌20分钟后自然冷却，放罐后离心去除菌体，通过阳离子交换树脂洗脱收集后，再进行喷雾干燥得到纯度为97%以上的苯丙氨酸。