[发明专利]一种提高酶热稳定性的方法有效
| 申请号： | 201611057002.X | 申请日： | 2016-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN108118065B | 公开（公告）日： | 2020-05-19 |
| 发明（设计）人： | 闫云君;李冠霖;苏枫;陈苑;方兴容;徐莉 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/10;C12N15/70;C12N9/20 |
| 代理公司： | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人： | 许恒恒 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开了一种提高酶热稳定性的方法，使用ProTherm数据库中的数据对6种蛋白质预测软件进行评测，以敏感度和准确度为评测标准，筛选出敏感度大于第一阈值，同时准确度大于第二阈值的软件，并获取各评测合格软件相对应的合格能量阈值范围；然后对酶运行筛选出的各评测合格软件，分别获得满足所述各评测合格软件相对应的合格能量差异阈值范围的突变点，取各评测合格软件获得的突变点的交集，再排除影响酶的催化能力的突变点，获得最终突变点；构建酶突变菌株，测定其热稳定性，获得热稳定性提高的突变体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 热稳定性 方法 | ||
【主权项】：
一种提高酶热稳定性的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)使用ProTherm数据库中的数据对CUPSAT,I‑Mutant 3.0,SDM,ELASPIC,FoldX,Rosetta ddg_monomer 6种蛋白质热稳定性预测软件进行评测，以敏感度和准确度为评测标准，筛选出敏感度大于第一阈值，同时准确度大于第二阈值的软件，其为评测合格软件，并获取各评测合格软件相对应的合格能量阈值范围；其中，所述第一阈值为40％,所述第二阈值为60％；(2)对酶运行步骤(1)筛选出的各评测合格软件，分别获得满足所述各评测合格软件相对应的合格能量差异阈值范围的突变点，取各评测合格软件获得的突变点的交集，即为该酶的热稳定性提高的突变点集合；(3)排除步骤(2)所述突变点集合中影响酶的催化能力的突变点，获得最终突变点；(4)根据步骤(3)获得的最终突变点或其组合构建酶突变菌株，测定其热稳定性，获得热稳定性提高的突变体。
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