[发明专利]一种促进脂肪干细胞生长的培养方法在审
申请号: | 201611058563.1 | 申请日: | 2016-11-28 |
公开(公告)号: | CN106399236A | 公开(公告)日: | 2017-02-15 |
发明(设计)人: | 谢海涛;张严冬;李相鲁 | 申请(专利权)人: | 广东万海细胞生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙)11531 | 代理人: | 李宏伟 |
地址: | 523000 广东省东莞市松山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种促进脂肪干细胞生长的培养方法,包括以下步骤采集脂肪组织,用洗涤液进行洗涤,去除肉眼可见的血管和纤维部分;将脂肪组织破碎成体积为0.5‑1.5mm3的组织块,用洗涤液清洗若干次至洗出液清亮;加入胶原酶,在37℃温度下均匀震荡消化55‑100分钟,使脂肪细胞充分消化,过滤,去除表层脂肪,获得含有脂肪干细胞的滤液,用离心机分离,沉淀即为脂肪干细胞群;将脂肪干细胞群重悬浮;将脂肪干细胞群重悬液置于培养瓶,加入培养液,以后每24小时更换培养液一次,待细胞生长达到80%融合,在培养瓶中加0.25%胰酶‑EDTA进行消化获得培养后的脂肪干细胞,其具有纯度高、增殖能力强的特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 促进 脂肪 干细胞 生长 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种促进脂肪干细胞生长的培养方法,其特征在于:包括以下步骤:1)采集脂肪组织,用洗涤液进行洗涤,去除肉眼可见的血管和纤维部分;2)将步骤1)获得的脂肪组织破碎成体积为0.5‑1.5mm3的组织块,用洗涤液清洗若干次至洗出液清亮;3)加入胶原酶,在37℃温度下均匀震荡消化55‑100分钟,使脂肪细胞充分消化,过滤,去除表层脂肪,获得含有脂肪干细胞的滤液,用离心机分离,沉淀即为脂肪干细胞群;4) 将步骤3)的脂肪干细胞群重悬浮,获得脂肪干细胞群的重悬液;5)将步骤4)获得的脂肪干细胞群重悬液置于培养瓶,加入培养液,以后每24小时更换培养液一次,更换两次,使脂肪干细胞群获得足够养分充分生长,待细胞生长达到80%融合,在培养瓶中加0.25%胰酶‑EDTA进行消化获得培养后的脂肪干细胞。
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