[发明专利]一种检测大分子水产胶原蛋白或明胶的PCR引物及方法在审
申请号: | 201611061393.2 | 申请日: | 2016-11-25 |
公开(公告)号: | CN106434984A | 公开(公告)日: | 2017-02-22 |
发明(设计)人: | 张俊杰;王永久;潘霞;段蕊 | 申请(专利权)人: | 淮海工学院;江苏悠然生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司32224 | 代理人: | 曹征贵 |
地址: | 222000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供一种检测大分子水产胶原蛋白或明胶的PCR引物及方法,所述PCR引物分别为COD ID NO:1&COD ID NO:2或TIL ID NO:1&TIL ID NO:2或RAF ID NO:1&RAF ID NO:2;所述检测方法是将提取的水产胶原蛋白的DNA模板进行PCR扩增,并进行琼脂糖凝胶电泳检测鉴定;本发明根据三种鱼类线粒体保守基因12SrRNA设计了大量引物,从中选取出了可对不同种类水产胶原蛋白进行有效检测的引物,通过PCR扩增及凝胶电泳检测,进行水产胶原蛋白的鉴定,其检测方法具有高特异性,高灵敏度以及实用性的特点,能够有效的对水产胶原蛋白物种来源进行检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 大分子 水产 胶原 蛋白 明胶 pcr 引物 方法 | ||
【主权项】:
一种检测大分子水产胶原蛋白或明胶的PCR引物及方法,其特征在于:利用引物与水产胶原蛋白中提取的DNA进行扩增,生成特异性片段;所述PCR引物分别为COD ID NO:1&COD ID NO:2或TIL ID NO:1&TIL ID NO:2或RAF ID NO:1&RAF ID NO:2;其中,所述引物上下游核苷酸序列分别为:COD ID NO:1ACCTCCGATTCCACGAAAGCOD ID NO:2ACGCTACACCTCGACCTGACTIL ID NO:1GGCTTGGTCCTGACTTTACTGTIL ID NO:2CCTGATACCGGCTCCTTGTTRAF ID NO:1AGCCCTAAACCCAGATGTCCRAF ID NO:2AGCCCATTTCTTCCCACTTC所述检测方法包括以下步骤:(1)对胶原蛋白样本进行预处理,直至胶原蛋白粉末被完全消化;(2)提取胶原蛋白样本中的DNA作为核苷酸检测的模板;(3)将样本中所提取的DNA模板进行PCR扩增;(4)将扩增的产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,并确定产物的目标条带。
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