[发明专利]一种检测游离态及结合态微量氰化物的方法

摘要

本发明公开了一种检测游离态及结合态微量氰化物的方法，属于分析检测技术领域，主要用于饮料酒及其原料分析。本发明利用一种特定的预处理及衍生化装置，可分别处理游离态或结合态氰化物样品。对于游离态氰化物，释放氢氰酸直接将氰根衍生；对于结合态氰化物先转变为游离氢氰酸，再与衍生试剂衍生。对于衍生物利用液相色谱‑质谱联用技术进行定性定量分析，采用内标法建立标曲，分别计算游离态和结合态氰化物含量。本发明建立的检测方法检测限可低至0.01μg/L，定量限为0.05μg/L，线性相关系数大于0.99，加标回收率为93.8％～106％，相对标准偏差小于10％。本发明方法检测灵敏度高，所需时间短，干扰小，可分别满足结合态和游离态氰化物测定的要求。

主权项

1.一种检测游离态及结合态微量氰化物的方法，其特征在于，利用相同的预处理及衍生化装置，对游离态和结合态的氰化物采用不同的预处理方式；对游离态氰化物的预处理是在预处理及衍生化装置中直接将氰根酸化后进行衍生化反应；对结合态氰化物的预处理是在预处理及衍生化装置中先采用沸水浴加热蒸馏法分解释放出游离态氰化物后再衍生化反应；对衍生物进行液质联用检测并计算氰化物的含量；所述预处理及衍生化装置包含样品反应瓶和衍生接收瓶，在样品反应瓶中进行酸解反应释放出游离态氰化物，通过导管将释放出的游离态氰化物导入到加入衍生剂的衍生接收瓶，在衍生接收瓶中进行衍生化反应；具体包含以下步骤：(1)游离态及结合态氰化物样品的预处理及衍生化a.游离态氰化物测定的样品预处理及衍生化步骤如下：准确称取适量液体样品或固体样品浸提液加入到预处理及衍生化装置的样品反应瓶，打开加酸口，迅速加入适量酸化试剂后立即关闭加酸口进行反应，打开可控开关通入氮气，反应过程中在通入氮气的条件下，将生成的氢氰酸转移到衍生接收瓶，衍生接受瓶预先加入一定量的衍生化试剂和内标溶液，反应结束后得到待测衍生物，用于液质联用仪分析；b.结合态氰化物测定的样品预处理及衍生化步骤如下：准确称取适量液体样品或固体样品加入到预处理及衍生化装置的样品反应瓶，并加入一定比例的蒸馏水和抗干扰剂，对于含乙醇样品，先加入适量氢氧化钠溶液碱解10min，然后打开加酸口，迅速加入过量酸化试剂后立即关闭加酸口，样品反应瓶加热反应并蒸馏，冷凝连通管接通冷却水，将馏出液中生成的氢氰酸转移到衍生接收瓶，衍生接受瓶预先加入一定量的衍生化试剂和内标溶液，馏出液在衍生接收瓶收集并进行衍生化反应，反应结束后定容并得待测衍生物，用于液质联用仪分析；(2)利用液质联用仪对氰化物衍生产物及内标¹³C¹⁵N‑氰化物衍生物进行检测分析；(3)使用LC‑MS/MS‑MRM方法制作氰化物标准曲线，并依据氰化物标准曲线采用内标法对样品中的游离态及结合态氰化物含量进行计算。