[发明专利]一种高粱红曲菌M‑3原生质体制备方法在审
| 申请号： | 201611083066.7 | 申请日： | 2016-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN106350505A | 公开（公告）日： | 2017-01-25 |
| 发明（设计）人： | 王耀斌 | 申请（专利权）人： | 陕西高新实业有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/04 | 分类号： | C12N15/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 西安亿诺专利代理有限公司61220 | 代理人： | 康凯 |
| 地址： | 710065 陕西省*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及高粱红曲菌M‑3原生质体制备方法。一种高粱红曲菌M‑3原生质体制备方法，包括以下步骤取纤维素酶、蜗牛酶、山梨醇、柠檬酸、磷酸氢二钠、高渗透稳定液、山梨醇、酶解液备用，以上原料均为市售；本发明所述高粱红曲菌M‑3原生质体制备方法，原生质体形成数为3000000个/毫升，原生质体原生质体再生率19.33％，再生菌落数为5800000个/毫升。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高粱 曲菌 原生 质体 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种高粱红曲菌M‑3原生质体制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）取纤维素酶、蜗牛酶、山梨醇、柠檬酸、磷酸氢二钠、高渗透稳定液、山梨醇、酶解液备用，以上原料均为市售；（2）取高粱红曲菌M‑3在摇床上以200转/分钟的速度，培养，温度为30℃，培养时间为60小时；（3）收集菌丝体，置于50毫升的无菌离心管中，以高渗透稳定液洗涤，并于4000转/分钟的速度，在4℃离心10分钟获得沉淀物，按质量体积比为1∶30的人比例加入裂解酶液，在30℃，以120转/分钟的振荡酶解3小时，然后离心取沉淀；（4）用高渗透稳定液洗涤2次除去酶液，用血球计数板计数，最后再次离心，得到沉淀物即原生质体。
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