[发明专利]番茄灰霉病菌LAMP检测引物、检测试剂盒及其应用有效
申请号: | 201611084324.3 | 申请日: | 2016-11-30 |
公开(公告)号: | CN106381340B | 公开(公告)日: | 2019-08-27 |
发明(设计)人: | 兰成忠;姚锦爱;阮宏椿;吴玮 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350013 福建省福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明公开了一种番茄灰霉病菌LAMP检测引物、检测试剂盒及其应用。其外侧引物对为F3/B3、内侧引物对为FIP/BIP;试剂盒包括LAMP反应混合液、1对外侧引物F3/B3、1对外侧引物FIP/BIP、8 U Bst聚合酶和核酸染料1000×SYBR Green I。通过待测样品DNA提取、环介导等温扩增、显色检测等三步即可检测到是否感染番茄灰霉病菌。本发明根据番茄灰霉病菌ITS序列设计引物,采用LAMP技术进行检测,特异性强、灵敏度高,具有快速、准确性高、灵敏性好、现场应用方便等优点,解决了现有技术中存在的周期长、灵敏度较低、成本高、现场应用困难等缺陷,在番茄灰霉病菌检测方面潜力巨大。 | ||
搜索关键词: | 番茄 病菌 lamp 检测 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种番茄灰霉病菌LAMP检测试剂盒,其特征在于,其组分为:一对外侧引物F3/B3、一对内侧引物FIP/BIP、LAMP反应混合液、8U Bst聚合酶以及核酸染料1000×SYBR Green I;所述引物的核苷酸序列为:F3: 5’‑ AGCTTGTCGACCAAGTTCTT‑3’,B3: 5’‑ ACGGTATCGGAAACCTTTGG‑3’,FIP: 5’‑ CCACCACCGAGAGAGTGGGTAATCGTGAAGCTGAAGGCTGT‑3’,BIP: 5’‑ TCTCCAAGATCCGCGAGGAGTCGATGGGACGACGGAGAA‑ 3’;所述LAMP反应混合液由40 mM Tris‑HCl,20 mM (NH4)2SO4,20 mM KCl,16 mM MgSO4,1.6 mol/L甜菜碱,2.0 mM dNTPs和0.2% Trion X‑100组成。
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