[发明专利]一种基于表面电荷变化测定分子间相互作用的方法

摘要

本发明公开了一种基于表面电荷变化测定分子间相互作用的方法，该方法能够测定包括蛋白质与蛋白质、蛋白质与小分子(DNA，以及其他小分子)、蛋白质与聚合物、以及蛋白质与纳米材料之间的相互作用，本发明通过固定一种分子，或直接测定混合溶液的方式测定相互作用，根据表面电荷的概念以及初始吸附常数的变化，对两种分子之间的相互作用进行判断，本发明能够在非标记、自由溶液中进行测定，检测快速准确。

主权项

一种基于表面电荷变化测定分子间相互作用的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、用缓冲冲洗空白微通道，使微通道表面电荷达到平衡；步骤2、向步骤1中的微通道中通入A分子的缓冲溶液，并测定A分子在空白微通道表面作用产生的流动电势随时间的变化，得到A分子与空白微通道表面作用的初始速率值；步骤3、用空白缓冲冲洗步骤2吸附稳定的A分子，得到吸附有A分子的微通道表面的流动电势的平均值；步骤4、冲洗步骤2中的微通道，使微通道表面电荷恢复，并用空白缓冲冲洗微通道；步骤5、向步骤3中的微通道中通入B分子的缓冲溶液，测定A分子和B分子相互作用产生的流动电势随时间的变化，作用达到平衡后得到微通道表面的流动电势值；步骤6、向步骤4中的微通道中通入B分子的缓冲溶液，测定B分子在空白微通道表面作用产生的流动电势随时间的变化，得到B分子与空白微通道表面作用的初始速率值；步骤7、冲洗步骤6中的微通道，并用缓冲冲洗微通道，使微通道表面电荷达到平衡；步骤8、向步骤7中电荷达到平衡后的微通道中通入A分子和B分子的混合溶液，得到混合溶液与空白微通道作用的初始速率值；步骤9、根据步骤2、步骤6和步骤8得到的数据或步骤2、步骤3和步骤5得到的数据计算出A分子和B分子之间相互作用的常数。