[发明专利]一种金花茶无菌外植体的获得方法在审
申请号: | 201611088574.4 | 申请日: | 2016-12-01 |
公开(公告)号: | CN106489741A | 公开(公告)日: | 2017-03-15 |
发明(设计)人: | 林茂;杨舒婷;王华新;廖美兰;黄欣;杜铃;汪小玉 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区林业科学研究院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京中政联科专利代理事务所(普通合伙)11489 | 代理人: | 郭晓华 |
地址: | 530002 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了一种金花茶无菌外植体的获得方法,包含如下步骤河沙的高温灭菌、蒸馏水的高温灭菌、种子的消毒灭菌、无菌播种然后在温度为21~25℃、沙子湿润的条件下培养,出芽的小苗直接转入金花茶的继代培养基中培养即可。本发明操作简单,设计合理,该金花茶无菌外植体的获得方法萌发时间短、萌发率高、成本低、获得外植体时间短、在金花茶种子萌发阶段以沙子替代培养基来进行种子的萌发,具有成本低,萌发时间短的优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 金花 无菌 外植体 获得 方法 | ||
【主权项】:
一种金花茶无菌外植体的获得方法,其特征在于,包含如下步骤:步骤一、河沙的高温灭菌,取河沙在压力为0.05~0.2Mpa、温度为90~140℃的条件下灭菌30~40min,自然冷却;步骤二、蒸馏水的高温灭菌,取蒸馏水在压力为0.05~0.2Mpa、温度为90~140℃℃的条件下灭菌30~40min,自然冷却;步骤三、种子的消毒灭菌,选取饱满的种子,先用中性洗涤剂浸泡20~30min后,在流水下冲洗40~60min,然后转入超净工作台上,用75%酒精浸泡种子40~60s,无菌水冲洗2~5次;再用0.1%升汞浸泡16~20min,同时轻轻震荡种子,使升汞与种子充分接触,最后用无菌水冲洗2~5次;步骤四、无菌播种,将经过消毒灭菌的金花茶种子装入盛有无菌水的组培瓶中浸泡18~36h,使其充分吸胀,然后在超净工作台上,取出金花茶种子的胚乳,将胚乳播入灭菌后的沙子中,向沙子中倒入无菌水使沙子湿润,确保沙子将胚乳完全埋入;步骤五、外植体的获得,将步骤四播种后的胚乳在温度为21~25℃、沙子湿润的条件下培养,出芽的小苗直接转入金花茶的继代培养基中培养。
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