[发明专利]一种高同步化的抗松材线虫病赤松体细胞胚胎发生及植株再生方法有效
| 申请号： | 201611089724.3 | 申请日： | 2016-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN106718889B | 公开（公告）日： | 2018-09-25 |
| 发明（设计）人： | 吴小芹;许建秀;叶建仁;吴静;朱丽华;潘珺 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高同步化的抗松材线虫病赤松体细胞胚胎发生及植株再生方法，包括胚性愈伤组织的诱导、增殖，体细胞胚的成熟、萌发和转化；所述的体细胞胚的成熟培养采用液—固增殖‑固成熟方式进行。本发明的高同步化的抗松材线虫病赤松体细胞胚胎发生及植株再生方法，以抗松材线虫病赤松的未成熟合子胚为外植体，通过对抗病赤松未成熟合子胚已成功诱导获得的胚性愈伤组织进行体细胞胚成熟、萌发与植株再生等试验，成功获得了成熟的体细胞胚和再生植株，并移栽成活，在成熟培养基上产生体细胞胚的萌发率和植株转化率高，分别为67.2%和46.5%，为抗病赤松的大规模繁殖和工厂化生产提供了重要的科学依据和技术支撑。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 同步 松材线虫 赤松 体细胞 胚胎 发生 植株 再生 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高同步化的抗松材线虫病赤松体细胞胚胎发生及植株再生方法，包括胚性愈伤组织的诱导、增殖，体细胞胚的成熟、萌发和转化；其特征在于：所述的体细胞胚的成熟培养采用液—固增殖‑固成熟方式进行；在所述的体细胞胚的成熟培养中，培养基中添加15mg/L ABA、140g/L PEG8000、3g/L植物凝胶、2‑8g/L肌醇和60g/L麦芽糖；所述的液—固增殖‑固成熟为：取生长良好的胚性愈伤组织，转入不含激素的DCR液体培养基中，剧烈震荡形成良好的悬浮体系，取培养好的悬浮液，均匀分散在灭菌后的滤纸上，用脱脂棉吸取水分，待水分沥干后，将有培养物的滤纸放入配制好的固体增殖培养基中，15天之后转入固体成熟培养基中。
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