[发明专利]一种检测鹅新城疫病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201611094408.5 | 申请日： | 2016-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN106367537B | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 刘文俊;周德荣;田允波;黄运茂;许丹宁;曹楠;李婉雁;郑灶波 | 申请（专利权）人： | 仲恺农业工程学院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 卢颂昇;张玲春 |
| 地址： | 510225 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速检测鹅新城疫病毒的RT‑LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质；引物为如SEQ ID N0:1～4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT‑LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、10倍反应缓冲液、链置換DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgS04、FIP引物、BIP引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；接着将反应体系于61～65℃恒温反应50min,最后于80℃灭活4min；通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读：在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有鹅新城疫病毒；在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有鹅新城疫病毒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 新城 疫病 rt lamp 可视化 试剂盒 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种检测鹅新城疫病毒的RT‑LAMP可视化试剂盒，其特征在于，包含引物组和显色物质；所述引物组如下所示：F3：5’‑GATGACAACATGTAGATGTGTA‑3’；B3：5’‑CCCAAGCTCAGTTGAGAT‑3’；FIP：5’‑CCGCCTAAGGATAAAACATTGCATGGGTATCATATCGCAAAACTATGG‑3’；BIP：5’‑ATAACTTTAAGGCTCAGTGGGGAATTGCCTGTTATTATTACTTGAGAA‑3’；所述显色物质为钙黄绿素和氯化锰；所述试剂盒还包含dNTP混合物、MgS04 、10倍反应缓冲液、链置換DNA聚合酶、甜菜碱和AMV逆转录酶。
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