[发明专利]曼氏无针乌贼鳃染色体的制备方法

摘要

本发明提供一种曼氏无针乌贼鳃染色体的制备方法，操作步骤为1）麻醉；2）秋水仙素处理；3）低渗；4）固定；5）解离；6）滴片；7）染色。有益效果为：麻醉剂为含有16.5~17.8‰氯化镁和0.13~0.15‰醋酸铵的2~4% 乙醇溶液，麻醉效果好，对染色体复制分裂无影响；秋水仙素中添加聚乙二醇可使其抑制纺锤体形成能力提高；低渗液为含0.02~0.03%维生素C的18~24%海水，可使细胞膜破裂，染色体分散，又不会造成染色体丢失甚至断裂；最终得到的染色体背景浅，有分裂中期，形态清晰，分散程度大。

主权项

曼氏无针乌贼鳃染色体的制备方法，其特征在于以下步骤：麻醉：将乌贼泡在麻醉剂中麻醉乌贼；秋水仙素处理：乌贼麻醉后注射秋水仙素，注射部位为乌贼眼睛下面的眼窝窦；低渗：将乌贼放入新鲜海水中用水流缓慢冲洗鳃部使乌贼复苏，培养，杀死乌贼，取出乌贼的鳃丝放入低渗液低渗；固定：小心弃去低渗液，加入新鲜配制的 Carnoy固定液，固定0.8~1.2h，期间换新鲜固定液2~4次，每15~25min换一次固定液，最后放置备用；解离：制片时弃去固定液，加入新鲜配制好的冰乙酸，用滴管轻轻吸打将组织捣碎，解离，然后用纱绢布过滤，用滴管吸取滤液；滴片：取若干片干净的载玻片，贴上标签，放在烤片机上，将吸取的细胞滤液滴落在载玻片中心；染色：取出滴好晾干的片子，平放好，用滴管吸取配制好的吉姆萨染液，将染液全部覆盖在载玻片上，放置，清洗，晾干。