[发明专利]利用特异性引物对紫背浮萍Sp10微卫星标记检测的方法

摘要

本发明提供一种利用特异性引物对紫背浮萍Sp10微卫星标记检测的方法，检测方法如下1）材料预处理采集紫背浮萍样品，驯养，封装，干燥，待用；2）紫背浮萍基因组DNA提取3）设计特异性引物微卫星点Sp10特异性引物FCCATCTGTCGTCCTTTTTCCC  RCGCCCCATCACTTATTTCGTA；4）利用上述引物对紫背浮萍不同地理群内个体的基因组DNA进行PCR扩增；5）对PRC产物初筛，加上样缓冲液，变性后于变性聚丙烯酰胺凝胶进行垂直电泳分析，从而获得紫背浮萍在Sp10核心序列区高度遗传变异的多态性图谱。本发明可快捷的获得紫背浮萍Sp10遗传标记基因座呈现高度遗传变异的多态性图谱，方法简便。

主权项

利用特异性引物对紫背浮萍Sp10微卫星标记检测的方法，其特征在于：检测方法如下：1）材料预处理：采集紫背浮萍样品，驯养，封装，干燥，待用；2）紫背浮萍基因组DNA提取：a在水浴锅中预热CTAB提取液；b研磨样品并转入离心管中，加入提取液，保温，颠倒混匀；c离心，取上清液；d加入酚/氯仿，混匀，离心，取上清液；e加入氯仿，混匀，离心，取上清液；f重复d、e 1~2次；g加入异丙醇混匀，沉淀，离心，弃上清液；h将沉淀物用乙醇漂洗，离心，弃上清液；i重复h；j检测，低温保存，备用；3）设计特异性引物：微卫星点Sp10特异性引物：F: CCATCTGTCGTCCTTTTTCCCR: CGCCCCATCACTTATTTCGTA；4）利用上述引物对紫背浮萍不同地理群内个体的基因组DNA进行PCR扩增；5）对PRC产物初筛，加上样缓冲液，变性后于变性聚丙烯酰胺凝胶进行垂直电泳分析，从而获得紫背浮萍在Sp10核心序列区高度遗传变异的多态性图谱。