[发明专利]一种西罗莫司的高效液相色谱检测方法

摘要

本发明提供了一种西罗莫司的高效液相色谱检测方法，以无水乙腈为溶剂，并以乙腈和缓冲盐溶液为流动相，可选地加入改性剂，可有效改善脯氨酰西罗莫司、西罗莫司互变异构体A、去甲基西罗莫司及西罗莫司主峰之间的分离。所述西罗莫司的高效液相色谱检测方法操作简便、专属性好，样品溶液稳定性好，可有效分离西罗莫司、互变异构体、同系物及其工艺副产物(如脯氨酰西罗莫司、去甲基西罗莫司)、开环降解产物(如断雷帕霉素)等，检出的杂质个数较多，各相关色谱峰(工艺副产物及降解产物等)之间分离良好，准确度高且重复性好，可有效克服现有技术中存在的缺陷，从而有效控制西罗莫司原料药及其制剂的产品质量，亦可用于评估西罗莫司的生产工艺。

主权项

1.一种西罗莫司的高效液相色谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将西罗莫司溶解于无水乙腈，制得西罗莫司样品溶液；取5～50μL进样至HPLC系统，流速为1.0～2.5mL·min^‑1，梯度洗脱，以277±2nm的检测波长进行HPLC分析；其中，采用C18反相色谱柱，流动相由缓冲盐溶液、乙腈和改性剂组成；其中，所述缓冲盐溶液为甲酸铵缓冲体系，所述缓冲盐溶液的pH为3.5～4.0；其中，所述缓冲盐溶液中盐的浓度为20～50mmol/L；其中，所述改性剂包括：甲基叔丁基醚或四氢呋喃；其中，线性梯度洗脱条件为：0～18min：43％A、57％B；18～25min：29％A、71％B；25～33min：100％B；33～43min：100％B；43min后：43％A、57％B；其中，A为20mM甲酸铵缓冲溶液，B为乙腈‑甲基叔丁基醚，乙腈‑甲基叔丁基醚的体积比为99：1；或线性梯度洗脱条件为：0～20min：44％A、56％B；20～30min：57％A、43％B；30～40min：100％B；40～50min：100％B；50min后：44％A、56％B；其中，A为20mM甲酸铵缓冲溶液，B为乙腈‑四氢呋喃，乙腈‑四氢呋喃的体积比为97：3。