[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌抗菌脂肽、海藻酸钠复合涂膜抑制花生黄曲霉污染的方法

摘要

本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌抗菌脂肽、海藻酸钠复合涂膜抑制花生黄曲霉污染的方法，第一步以解淀粉芽孢杆菌Zn01为菌种，依次通过种子培养、扩大培养和发酵生产获得发酵液；第二步得抗菌脂肽粗提物；第三步称取40g分析纯海藻酸钠于锥形瓶中，溶于1L去离子水中，加热至完全溶解，以总质量份数0.4％的添加量加入到第二步的抗菌脂肽粗提液中，制备出抗菌脂肽‑海藻酸钠复合涂膜液；第四步用喷雾装置将抗菌脂肽‑海藻酸钠复合涂膜液均匀喷施于花生表面，常温保存。本发明利用分离、筛选的花生黄曲霉高效拮抗菌株Zn01及其有效拮抗物质抗菌脂肽，结合复合涂膜技术，通过在花生表面覆盖抗黄曲霉复合涂膜的方法抑制黄曲霉生长，减少黄曲霉毒素污染。

主权项

一种解淀粉芽孢杆菌抗菌脂肽、海藻酸钠复合涂膜抑制花生黄曲霉污染的方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步：以解淀粉芽孢杆菌Zn01为菌种，依次通过种子培养、扩大培养和发酵生产获得发酵液；第二步：取第一步中获得的发酵液400ml，用6mol/L HCL调节至PH＝2.0，4℃静置过夜，利用10000r/min离心20min后沉淀用甲醇溶解、抽滤、滤液经旋转蒸发至干燥，用PBS缓冲液(0.02mol/L，PH7.2)定容至400ml,得抗菌脂肽粗提物，其抗菌效价约为5.0×105IU/L；第三步：称取40g分析纯海藻酸钠于锥形瓶中，溶于1L去离子水中，加热至完全溶解，以总质量份数0.4％的添加量加入到第二步的抗菌脂肽粗提液中，制备出抗菌脂肽‑海藻酸钠复合涂膜液；第四步：在具有搅拌功能的密闭容器中，用喷雾装置将抗菌脂肽‑海藻酸钠复合涂膜液均匀喷施于花生表面，复合涂膜液与花生最佳混合比例为20μl/g，在花生表面形成抗菌脂肽‑海藻酸钠复合涂膜，50℃低温烘干或自然晾晒至花生水分10.0％以下，常温保存。