[发明专利]用于表达AIF及整合有AIF的重组单链抗体的菌株及该菌株的应用有效
| 申请号： | 201611112189.9 | 申请日： | 2016-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN106591207B | 公开（公告）日： | 2019-10-29 |
| 发明（设计）人： | 陈廷涛;辛洪波;王鑫 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P21/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人： | 刘华 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种用于表达AIF及整合有AIF的重组单链抗体的菌株及该菌株的应用。该技术方案利用单链抗体T18与肿瘤内皮细胞标志分子TEM1特异性结合的特性，构建了AIF‑T18蛋白复合物，从而实现凋亡诱导因子AIF对肿瘤细胞的靶向给药，提升其对肿瘤细胞的诱导凋亡作用。本发明首先以pET302质粒为载体构建了整合有AIF‑T18表达基因的重组质粒，而后以原核表达系统E.coli BL21为宿主将重组质粒导入其中，得到了具有稳定表达能力的重组菌株。在此基础上，本发明围绕该重组菌的特性设计了高效的蛋白表达方法，并针对以包涵体形式存在的蛋白表达产物匹配了适宜的变性、复性、纯化条件，从而实现了AIF‑T18的有效制备。 | ||
| 搜索关键词： | 菌株 整合 重组单链抗体 肿瘤细胞 重组质粒 宿主 蛋白表达产物 诱导凋亡作用 原核表达系统 肿瘤内皮细胞 蛋白复合物 特异性结合 靶向给药 标志分子 表达基因 纯化条件 单链抗体 蛋白表达 凋亡诱导 特性设计 稳定表达 载体构建 重组菌株 包涵体 重组菌 变性 复性 构建 质粒 制备 匹配 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于表达整合有AIF的重组单链抗体的菌株，其特征在于该菌株是由以下方法制备的：1)取序列如SEQ ID No.2所示的Aif‑T18表达基因，通过酶切方式与pET302质粒连接，得到重组质粒pET302‑Aif‑T18；2)取步骤1)所得的重组质粒pET302‑Aif‑T18，转入E.coli BL21中，得到重组菌pET302‑Aif‑T18‑B21，即为所述用于表达整合有AIF的重组单链抗体的菌株。
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