[发明专利]一种抗GPC3抗体及其制备方法和用途

摘要

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种抗GPC3抗体及其制备方法和用途。本发明提供一种抗GPC3抗体，所述抗GPC3抗体的重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR‑H1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR‑H2和氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR‑H3；所述抗GPC3抗体的轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR‑L1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR‑L2和氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR‑L3。本发明发明人利用噬菌体展示技术对GPC3单链抗体进行了亲和力成熟筛选，从而获得了高亲和力的对GPC3的单链抗体。 1

主权项

1.一种抗GPC3抗体，所述抗GPC3抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述抗GPC3抗体具有如下技术特征中的一个或多个：

<1>重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR‑H1；

<2>重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR‑H2；

<3>重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR‑H3；

<4>轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR‑L1；

<5>轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR‑L2；

<6>轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR‑L3。

2.如权利要求1所述的一种抗GPC3抗体，其特征在于，所述抗GPC3抗体的重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR‑H1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR‑H2和氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR‑H3；

和/或，所述抗GPC3抗体的轻链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR‑L1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR‑L2和氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR‑L3；

和/或，所述抗GPC3抗体为单克隆抗体；

和/或，所述抗GPC3抗体为单链抗体；

和/或，所述抗GPC3抗体的重链可变区的氨基酸序列包括：

a)如SEQ ID No.80‑108其中之一所示的氨基酸序列；或

b)与SEQ ID No.80‑108其中之一所示的氨基酸序列具有80％以上同源性、且具有a)所限定的氨基酸序列功能的氨基酸序列；

和/或，所述抗GPC3抗体的轻链可变区的氨基酸序列包括：

c)如SEQ ID No.51‑79其中之一所示的氨基酸序列；或

d)与SEQ ID No.51‑79其中之一所示的氨基酸序列具有80％以上同源性、且具有c)所限定的氨基酸序列功能的氨基酸序列。

3.一种分离的多核苷酸，编码如权利要求1‑2任一权利要求所述的抗GPC3抗体的重链可变区和/或轻链可变区或全长氨基酸。

4.一种构建体，含有如权利要求3所述的分离的多核苷酸。

5.一种抗体的表达系统，所述表达系统含有如权利要求4任一权利要求所述的构建体或基因组中整合有外源的如权利要求3所述的多核苷酸。

6.如权利要求1‑2任一权利要求所述的抗GPC3抗体的制备方法，包括如下步骤：在适合表达所述抗GPC3抗体的条件下，培养如权利要求5所述的抗体的表达系统，从而表达出所述的抗GPC3抗体，纯化分离出所述的抗GPC3抗体。

7.如权利要求1‑2任一权利要求所述的抗GPC3抗体在制备或筛选治疗药物中的用途、或制备诊断药物中的用途。

8.一种分离的多肽，所述多肽包括跨膜域、胞内域和胞外域，所述胞外域包括如权利要求1‑2任一权利要求所述的抗GPC3抗体。

9.如权利要求8所述的多肽，其特征在于，所述多肽为嵌合抗原受体；

和/或，所述跨膜域包括CD8α、CD28、DAP10；

和/或，所述胞内域包括4‑1BB、CD28、OX40、ICOS、CD3zeta、DAP10；

和/或，所述多肽自N端至C端依次包括所述抗GPC3抗体、跨膜域、胞内域。

10.一种细胞，所述细胞含膜结合的如权利要求8‑9任一权利要求所述的多肽，所述细胞为T淋巴细胞和/或NK细胞；

和/或，所述多肽为嵌合抗原受体。

和/或，当所述多肽结合于GPC3抗原时，所述T淋巴细胞和/或NK细胞可以活化和/或刺激从而得以增殖。

和/或，所述T淋巴细胞和/或NK细胞表面表达所述抗GPC3抗体。

11.一种诊断试剂盒，包含诊断有效剂量的如权利要求1‑2任一权利要求所述的抗GPC3抗体或其免疫偶联物。