[发明专利]一种海洋动物源农药的生产方法

摘要

一种海洋动物源农药的生产方法，具体步骤为原料预处理、醇提、离心、预过滤、超滤浓缩、盐析、溶解、酶解、第二次超滤浓缩、层析、第三次超滤浓缩、喷雾干燥、复配。整个制备过程反应条件温和，工艺流程简单，除乙醇外不使用其它有机溶剂；使用盐析法将蛋白、多糖结合皂苷进行沉淀分离；同时，盐析除掉大部分脂类，与传统使用醚类等有机溶剂去除脂类的方法相比更加安全环保；使用固定化酶将大分子蛋白分解为多肽及氨基酸，有效降低后续处理中大孔树脂对蛋白的吸附，从而增加洗脱液中目标产物的量。使用香草醛‑硫酸显色法对动物源农药原料粉进行海星皂苷含量分析，含量为69.4‑73.1%，通过复配，最终获得一种海洋动物源农药。

主权项

一种海洋动物源农药的生产方法，其特征是，包含如下生产步骤：a)原料预处理：新鲜海星清洗除去泥沙杂质后，进行晾晒风干，粉碎机粉碎至80～200目；b)醇提：加入粉碎后海星重量5～15倍浓度为55%(v/v)乙醇溶液，65℃保温，搅拌提取5～15h;c)离心：使用离心机将海星组织与醇提液进行分离，保留上清液;e)预过滤：使用45μm超滤膜对c)中的上清液进行过滤，收集滤出液；f)超滤浓缩：使用中空纤维素膜截留量1000D对e）中的滤出液进行超滤浓缩，加入适量纯化水，除去小分子杂质、盐和乙醇，浓缩至体积为原体积的1/20～1/10，得到超滤浓缩液;g)盐析：向步骤f)中的超滤浓缩液中逐步加入NH4Cl至饱和，静置5～10h，离心保留沉淀;h)溶解：将步骤g)中的离心沉淀用与f)中超滤浓缩液等体积的纯化水溶解;i)酶解：使用固定化蛋白酶对h)中的溶液进行酶解，50℃保温24小时;j)第二次超滤浓缩：将固定化蛋白酶从酶解液中移出，使用中空纤维素膜截留量10000D进行超滤浓缩，加入适量纯化水，除去氨基酸和多肽，浓缩为酶解液体积的1/20～1/10;k)层析：将步骤j)中的浓缩液上样于处理过的AB‑8型大孔吸附树脂，用少量10%的乙醇溶液进行洗柱，后用70%乙醇进行洗脱，洗脱体积为5～10倍柱体积，收集洗脱液;l) 第三次超滤浓缩：使用中空纤维素膜截留量10000D进行超滤，浓缩至喷雾干燥合适浓度;m)喷雾干燥：将步骤l)中获得的浓缩液进行喷雾干燥，设置进口温度为160℃，出口温度为60℃，喷雾干粉为动物源农药原药；n)复配：将步骤m)中的动物农药原药加入农药助剂进行复配，最终获得动物源农药。