[发明专利]共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子及制备方法

摘要

本发明公开了一种共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子及制备方法，制备方法为：(1)聚赖氨酸接枝β‑环糊精衍生物的制备；(2)载化疗药物的纳米粒子的制备；(3)共载化疗药物和核酸的纳米粒子的制备；(4)共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子的制备；本发明制备工艺简单，易于操作，省时节能，且所用载体材料生物安全性高，具有良好生物相容性、可生物降解性、无毒性，无免疫原性。本发明的共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子具有典型的核‑壳结构，粒径为150～200nm，可以有效地将化疗药物和核酸同时携带进入高表达CD44分子的细胞，抑制细胞增殖，并具有显著的体内外肿瘤靶向性。

主权项

1.一种共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子的制备方法，其特征是包括如下步骤：(1)将6‑醛基化β‑环糊精、聚‑L‑赖氨酸氢溴酸盐溶于pH＝4.4的醋酸盐缓冲溶液中，室温搅拌1‑2h，加入氰基硼氢化钠，室温继续搅拌48～72h；加氢氧化钠水溶液使体系呈中性，在半透膜截留分子量为7000Da的条件下超纯水透析2d、透析液冷冻干燥获得聚赖氨酸接枝β‑环糊精衍生物；所述聚赖氨酸接枝β‑环糊精衍生物简称PLCD；所述聚‑L‑赖氨酸氢溴酸盐粘均分子量为15000～30000Da；以赖氨酸结构单元计的聚‑L‑赖氨酸氢溴酸盐、6‑醛基化β‑环糊精和氰基硼氢化钠的摩尔比为1:(0.5～2):4；(2)按质量比为1:(0.3～0.5)的比例，将PLCD与疏水性化疗药物溶解于二甲基亚砜中，室温搅拌8～12h，在半透膜截留分子量为8000～14000Da的条件下纯水透析24h、冷冻干燥，得到载化疗药物的纳米粒子；(3)将载化疗药物的纳米粒子与核酸分别溶于DEPC水中，调节两种溶液的浓度使载化疗药物的纳米粒子与核酸的N/P摩尔比为30～50:1，将二者等体积混合，涡旋震荡20～30s，经室温静置孵育30～60min，得共载化疗药物和核酸的纳米粒子；(4)将共载化疗药物和核酸的纳米粒子滴加于质量浓度为0.75～1.0mg/mL的透明质酸水溶液中，在200‑400rpm的条件下，搅拌5‑10min，得共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子；透明质酸与共载化疗药物和核酸的纳米粒子的质量比为(3～4):6。