[发明专利]一种利用鸡粪降解液异养培养微藻的方法

摘要

本发明公开了一种利用鸡粪降解液异养培养微藻的方法，首先鸡粪降解，取鸡粪稀释液在40rpm～60rpm的转速下降解得到低氮降解液，另取鸡粪稀释液在240rpm～260rpm的转速下降解得到高氮降解液；然后将摇床上培养后得到的微藻液接种到培养罐中，微藻异养培养180～220h后完成微藻的异养培养；其中异养培养过程中，前期向培养体系添加高氮降解液，后期向培养体系添加低氮降解液。在整个微藻培养过程中，向培养液中直接加入鸡粪高、低氮降解液即可，无需另外加入氮源，因而整个过程效率高、节省能源和成本。

主权项

一种利用鸡粪降解液异养培养微藻的方法，其特征在于包括以下步骤：①鸡粪降解；取养鸡场的新鲜鸡粪，用蒸馏水稀释、搅匀得到鸡粪稀释液；取鸡粪稀释液转移入三角瓶中，在三角瓶的瓶口用纱布封住瓶口，然后将三角瓶转移至摇床中，在40转/分钟～60转/分钟的转速下降解4～6天后获得降解后的物料，过滤得到低氮降解液，低氮降解液的总氮、硝氮、氨氮含量分别为0.50～0.8g/L、130～260mg/L、300～360mg/L，低氮降解液杀菌后转移至冰箱保存待用；另取鸡粪稀释液转移入三角瓶中，在三角瓶的瓶口用纱布封住瓶口，然后将三角瓶转移至摇床中，在240转/分钟～260转/分钟的转速下降解4～6天后获得降解后的物料，过滤得到高氮降解液，高氮降解液的总氮、硝氮、氨氮含量分别为1.05～1.5g/L、780～910mg/L、70～120mg/L，高氮降解液杀菌后转移至冰箱保存待用；②微藻异养培养；先对微藻种子进行摇床培养，在三角瓶中装入微藻培养液，从保贮斜面上取微藻细胞接种到三角瓶中的对应微藻的培养液中，然后将三角瓶放在摇床上，设置转速140～160转/分钟，培养温度28℃～32℃，培养65～75 h；然后将摇床上培养后得到的微藻液以8%～12%(v/v)接种量接种到培养罐中，培养罐中已加入对应微藻的培养液,微藻异养培养180～220h后完成微藻的异养培养；微藻异养培养时，培养体系的pH控制在5.0～7.0，温度28～32℃，通气速率0.8～1.2vvm，搅拌转速180～220转/分钟，培养体系的pH值用4M～6M的硫酸或NaOH水溶液调节；所述微藻为小球藻，小球藻培养液中包括Bold’s basal media培养基、葡萄糖、酵母粉和甘氨酸，各组分含量葡萄糖10.0 g/L，酵母粉2.0 g/L，甘氨酸 1.0 g/L；其中异养培养过程中，在异养培养开始至第100～120小时内，以14～16 mL/L/Day向培养体系添加步骤①准备的高氮降解液，然后从第100～120小时直至培养期结束，以14～16 mL/L/Day向培养体系添加步骤①准备的低氮降解液。