[发明专利]聚多巴胺修饰的离心管及其制法和在核酸分离中的应用有效
申请号: | 201611142730.0 | 申请日: | 2016-12-13 |
公开(公告)号: | CN106497769B | 公开(公告)日: | 2019-09-13 |
发明(设计)人: | 贾丽;钟子涛 | 申请(专利权)人: | 华南师范大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 郭炜绵 |
地址: | 510631 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种聚多巴胺修饰的离心管及其制备方法和在核酸分离中的应用,其制备方法包括以下步骤:将盐酸多巴胺和过硫酸铵溶解在碱性溶液中,混匀制得多巴胺悬浮液;然后加入离心管中,在摇床上振荡反应,在离心管壁上会形成聚多巴胺薄膜;离心管内部用40℃氮气烘干,再依次用三羟甲基氨基甲烷缓冲液和去离子水洗涤,再经40℃氮气烘干,得到聚多巴胺修饰的离心管。本发明的聚多巴胺修饰的离心管以聚多巴胺涂层为载体吸附DNA,利用聚多巴胺与DNA的静电吸附作用,只需要在离心管中就可以实现对核酸的抓取,再通过静电排斥作用对所吸附的DNA进行洗脱即得到DNA,该离心管的普适性和实用性为DNA提取提供了一种便捷的方法。 | ||
搜索关键词: | 多巴胺 修饰 离心管 及其 制法 核酸 分离 中的 应用 | ||
【主权项】:
1.聚多巴胺修饰的离心管在核酸分离中的应用,其特征在于包括以下步骤:取细菌裂解液,加入吸附液,充分混合后,加入到聚多巴胺修饰的离心管中;将混合液在室温下震荡孵育10 min后,将上清液移出;将聚多巴胺修饰的离心管用70%的乙醇(V/V)洗两次,在室温下放置干燥;然后向其中加入洗脱液,室温下震荡孵育10 min,使吸附的DNA从管壁上洗脱下来,将上清液移出,即为分离得到的DNA;所述的第一个吸附液是10 mmol/L MES‑HCl,pH值2.0;所述的第二个吸附液是10 mmol/L Tris‑HCl和1 mmol/L EDTA,pH 值8.0;所述的聚多巴胺修饰的离心管,其制备方法包括以下步骤:将盐酸多巴胺和过硫酸铵溶解在碱性溶液中,混合均匀,制得多巴胺悬浮液;将多巴胺悬浮液加入离心管中,在摇床上振荡反应,在离心管壁上会形成聚多巴胺薄膜;将多巴胺悬浮液倒出后,离心管内部用40℃氮气烘干,再依次用三羟甲基氨基甲烷缓冲液和去离子水洗涤,再经40℃氮气烘干,得到聚多巴胺修饰的离心管。
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