[发明专利]一种自主清除H2O2的酶级联合成松脂素的方法有效
| 申请号： | 201611158402.X | 申请日： | 2016-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN106591390B | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 周景文;陈坚;吕永坤;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P17/18 | 分类号： | C12P17/18;C12N1/21;C12N15/70;A61K48/00;A61P31/18;A61P35/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 彭素琴<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种自主清除H2O2的酶级联合成松脂素的方法，属于生物化工领域。本发明使用相对廉价且易于工业化大规模获取的丁香酚为底物，通过酶级联合反应可自主清除松脂素合成过程中产生的H2O2，从而解除其对酶活性的抑制作用。此外，本发明方法使用全细胞作为催化剂，细胞可以提供了辅因子再生的环境，从而在反应过程中无需外源添加昂贵的辅因子。本发明松脂素的产量可达到7.12g/L，转化率为61.55％。 | ||
| 搜索关键词： | 松脂 辅因子 生物化工领域 方法使用 合成过程 丁香酚 酶活性 全细胞 底物 外源 催化剂 联合 细胞 再生 | ||
【主权项】：
1.一种自主清除H2O2的松脂素高效合成方法，其特征在于，以重组大肠杆菌全细胞作为催化剂，以丁香酚为底物；所述的重组大肠杆菌过量表达香草醇氧化酶PsVAO和过氧化物酶Prx02，所述重组大肠杆菌共表达PsVAO和Prx02，或表达PsVAO和Prx02融合基因，所述的香草醇氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，过氧化物酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，全细胞转化体系的反应介质为10-200mM的磷酸盐缓冲液，全细胞转化体系中重组大肠杆菌的浓度为OD600＝18±1，底物浓度范围为0.1-5.0％，所述的全细胞转化体系的pH范围为6.0-9.0，反应温度范围为25-42℃。/n
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