[发明专利]一种单细胞基因表达定量分析的方法在审
| 申请号： | 201611158473.X | 申请日： | 2016-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN106520997A | 公开（公告）日： | 2017-03-22 |
| 发明（设计）人： | 郭国骥;赖迪文;王翠;姜蒙蒙 | 申请（专利权）人： | 南京诺唯赞医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京正联知识产权代理有限公司32243 | 代理人： | 黄智明 |
| 地址： | 210038 江苏省南京市南京经*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种单细胞基因表达定量分析的方法，包括在反应容器中加入单细胞，裂解该单细胞，在反应容器中加入反应体系，执行多位点RT，以该多位点RT获得的cDNA为模板执行多位点PCR扩增，最后以多位点PCR扩增获得的序列为底物，加入特异性引物执行特异性定量PCR来分析该单细胞中特定基因的表达量，其中在反应容器中加入的反应体系包括反应混合物、引物池、逆转录酶/聚合酶及无核酸酶去离子水，引物池中包含至多500对的多对引物，所述反应混合物包含缓冲体系、dNTP和特异性增强因子。本发明的方法能够有效的获取单个细胞中的大量基因表达及基因突变信息，实现普通RT‑qPCR无法实现的高通量和高灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 单细胞 基因 表达 定量分析 方法 | ||
【主权项】：
一种单细胞基因表达定量分析的方法，其特征在于，所述方法包括：在反应容器中加入单细胞，裂解该单细胞，在反应容器中加入反应体系，执行多位点RT，以该多位点RT获得的cDNA为模板执行多位点PCR扩增，最后以多位点PCR扩增获得的序列为底物，加入特异性引物执行特异性定量PCR来分析该单细胞中特定基因的表达量，其中在反应容器中加入的反应体系包括反应混合物、引物池、逆转录酶/聚合酶及无核酸酶去离子水，引物池中包含至多500对的多对引物，其中所述反应混合物包括缓冲体系、dNTP和特异性增强因子。
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