[发明专利]用于多模态成像研究的结直肠癌肝转移动物模型构建方法

摘要

本发明公开了一种用于多模态成像研究的结直肠癌肝转移动物模型构建方法，克服了原有结直肠癌肝转移瘤种植模型肠道梗阻发病率高、模型生存时间短、不能适应长时间实验的缺陷。本发明所用动物为5周龄的BALB/C‑nu‑nu雌性裸鼠，所用注射液为人结直肠癌细胞(HT29)，构建操作将用0.01MPBS配置的浓度为2.5×107/ml的结直肠癌细胞0.1ml注入脾内，注射时间约3min，注射结束后将脾脏放回腹腔内，模型制作后七周，即可得到结直肠癌肝转移裸鼠模型。由于所用的人结直肠癌细胞(HT29)其浓度为2.5×107/ml，所用剂量为0.1ml，只需一次性将细胞悬液注入脾脏既可以得到肝转移模型，因而本发明所述方法操作简单，造模成功率高，具有一定的经济和实用价值，值得推广。

主权项

一种用于多模态成像研究的结直肠癌肝转移动物模型构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选取BALB/C‑nu‑nu雌性裸鼠50只，每只原始体重在(17±3)g，将其分成实验组和对照组，实验组为40只BALB/C‑nu‑nu雌性裸鼠，对照组为10只BALB/C‑nu‑nu雌性裸鼠。(2)模型制作之前一周为稳定期，禁止对裸鼠进行一切刺激性的操作，实验组实验前裸鼠禁食进水12小时，细胞室制作细胞悬液，浓度为2.5×107/ml。裸鼠用10％的水合氯醛腹腔注射麻醉，麻醉剂剂量0.004ml/g，麻醉后仰卧位固定于手术板上，左上腹纵形切口，进腹后游离脾脏并拉至切口外，用5号针从脾脏下极进针穿刺脾脏，从脾脏下极穿刺脾脏后针头向脾脏上极方向推进，进针长度约1cm，缓慢注入结肠癌细胞0.1ml不等，可见脾包膜鼓起变白，注射时间约3min，注射结束后待脾脏颜色转红，快速拔出针头后用75％的酒精按压止血，并用生理盐水冲洗，确保无明显出血及癌细胞溢出，尽量避免腹腔内的种植转移，最后把脾脏放回腹腔内，缝合伤口；(3)对照组脾脏内注射无菌PBS，余操作同实验组。(4)模型制作完毕后，继续在SPF环境中饲养，并定期测量裸鼠的体重及观察裸鼠的精神状况，饲养七周后，实验组中的裸鼠即成为结直肠癌肝转移动物模型。