[发明专利]一种高大环柄菇原生质体的制备方法在审
| 申请号： | 201611160808.1 | 申请日： | 2016-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN106520578A | 公开（公告）日： | 2017-03-22 |
| 发明（设计）人： | 郝青 | 申请（专利权）人： | 陕西玉航电子有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14 |
| 代理公司： | 西安亿诺专利代理有限公司61220 | 代理人： | 贾苗苗 |
| 地址： | 710065 陕西省西安市高新*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种高大环柄菇原生质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤称量黄豆12．5g，在水中浸泡10‑15h后用豆浆机将其磨成豆浆，过滤后加入葡萄糖20．0g，调节总容积为10130mL(pH自然)，混合均匀，分装灭菌以备用；本发明所述方法制备的高大环柄菇原生质体，原生质体产出量高，可充分发挥酶的效力，本发明工艺简单，使用实用性强，可工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高大 环柄菇 原生 质体 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种高大环柄菇原生质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤:（1）称量黄豆12．5g，在水中浸泡10‑15h后用豆浆机将其磨成豆浆，过滤后加入葡萄糖20．0g，调节总容积为10130mL(pH自然)，混合均匀，分装灭菌以备用；（2）将固体斜面培养好的高大环柄菇菌种接种于已灭菌豆浆培养基中，在25‑30℃，150‑200r/min下摇床培养；（3）待菌丝体长出来以后，取培养一定时间的菌丝培养液5mL于无菌离心管中，用灭菌的渗透压稳渗荆洗涤，在800r/min离心，弃去上清液收集菌体，再加入1mL相应的酶解液，置一定温度下恒温培养，隔时摇动，并用无菌吸管猛吸多次，促使原生质体从残余菌丝上释放，间隔一定时间取样在10x40倍的光学显微镜下用血球计数板计算原生质体产出量；（4）在3000‑3500r/min离心10min弃去酶液上清液，用渗透压稳渗洗涤2次即获得纯化原生质体。
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