[发明专利]一种热化疗一体化纳米颗粒及制备和应用

摘要

本发明涉及一种热化疗一体化的纳米颗粒及制备和应用，包括金纳米棒的制备、DNA四面体的合成和金纳米棒连接DNA四面体。具体涉及了金纳米棒表面通过化学键连接DNA四面体结构，构成同时具备纳米金棒热疗与DNA载药相结合的纳米颗粒。本发明属于纳米生物材料领域。本发明能在较小的光照和化疗药物剂量下杀死癌细胞；该纳米颗粒结构简单，具备较高的光热转化效率；本发明中的制备方法简单，可操作性强，能进一步应用于癌症的光热治疗及化疗相结合领域。

主权项

1.一种热化疗一体化的纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）金纳米棒的制备：/n金纳米棒是根据无种子生长法合成得到的：首先将8 g的表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB) 溶解在192.5 ml的去离子水中，加入9.12 ml浓度为10 mM的氯金酸溶液，搅拌均匀后加入3.6 ml浓度为10 mM的硝酸银溶液作为形貌控制因子，加入22.8 ml浓度为56.2 mM的对苯二酚和22.8 微升浓度为8.5 mM的冰点温度的硼氢化钠溶液作为还原剂；整个反应体系经过37℃保温12 h之后就可以得到紫外吸收峰在980 nm的金纳米棒，9500转离心35 min后收集并分散在120 ml去离子水中；/n（2）DNA四面体的合成：/n各取2微升不同的DNA单链，50μM，加入到42微升Tris-MgCl₂溶液中，所述Tris-MgCl₂溶液为Tris 10mM, MgCl₂ 50mM, pH8，将混合溶液置于PCR仪中，反应温度为95℃，10分钟后冷却至4℃，继续反应30分钟，DNA单链即可通过碱基互补配对自组装成DNA四面体；/n所述DNA单链碱基序列如序列表中 1-4 所示 ，其中序列2,3,4的DNA 5’端有巯基修饰，因此，形成的DNA四面体为巯基修饰的DNA四面体SH-TDN；/n（3）金纳米棒连接DNA四面体：/n取1ml步骤（1）中的金纳米棒溶液，在10000转离心10min，去除上清，加入50微升，20μ M的巯基聚乙二醇（SH-PEG），剧烈振荡20s，然后加入1ml，0.01wt%的Tween20重悬金纳米棒；将上述过程重复3遍，使得SH-PEG彻底取代金纳米棒表面的CTAB；/n在SH-PEG保护好的金纳米棒中加入巯基修饰的DNA四面体溶液，过夜振荡，使得SH-TDN取代金纳米棒表面的SH-PEG，生成DNA四面体修饰的金纳米棒颗粒，即热化疗一体化纳米颗粒。/n