[发明专利]血小板衍生生长因子的检测方法有效
申请号: | 201611183329.1 | 申请日: | 2016-12-20 |
公开(公告)号: | CN106770553B | 公开(公告)日: | 2018-11-30 |
发明(设计)人: | 缪鹏;杨大威;王弼陡;孙海旋;唐玉国 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | G01N27/30 | 分类号: | G01N27/30;G01N27/327 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 韩飞 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本案涉及血小板衍生生长因子的检测方法,采用电化学的方法,在金电极表面修饰序列一,然后适配体一通过与序列一的互补配对也结合至电极表面;然后浸入包含待测样和适配体二的溶液中,样本中的血小板衍生生长因子(PDGF‑BB)会与适配体一及适配体二结合,进而将适配体一从电极表面取代下来,此时电极表面的序列一暴露出的黏性末端将触发杂交链式反应,其产物进一步吸附电活性物质六铵合钌,产生明显的电化学响应;通过电化学工作站读出差分脉冲伏安信息,经分析,其与PDGF‑BB浓度在一定的浓度范围内存在线性关系,检测限为0.3pg/mL,满足实际应用所需要的PDGF‑BB浓度水平。 | ||
搜索关键词: | 适配体 血小板衍生生长因子 电极表面 检测 链式反应 电化学工作站 电化学响应 电活性物质 金电极表面 电化学 浸入 黏性 互补配对 浓度水平 修饰序列 脉冲 触发 测样 吸附 铵合 内存 样本 杂交 出差 暴露 应用 分析 | ||
【主权项】:
1.一种血小板衍生生长因子的检测方法,其特征在于,包括:1)以金电极作为工作电极,对金电极进行预处理;2)将序列一修饰于所述金电极表面;3)将巯基己醇修饰于所述金电极表面,用于对未修饰上序列一的金电极表面进行占位;4)将适配体一修饰到所述金电极上,以使适配体一与序列一互补配对;5)将所述金电极插入含适配体二的待测液中,以使得适配体一、适配体二和血小板衍生生长因子三者结合,并将适配体一从电极表面取代下来,从而使金电极表面的序列一暴露出黏性末端;6)将所述金电极与序列二、序列三和序列四结合,从而触发杂交链式反应,在金电极表面生成杂交链式反应产物;7)以六铵合钌作为电活性物质,采用差分脉冲伏安法获得所述杂交链式反应产物吸附六铵合钌后所产生的电化学响应信号;8)根据电化学响应信号与血小板衍生生长因子浓度的对应关系,获得待测液中血小板衍生生长因子的浓度;其中,序列一为ACATACAATAGATCGC‑SH;序列二为GCGATCTATTGTATGTTTTAGCTTATCAGACTGATGTTGA;序列三为ATCAGACTGATGTTGATGAAACTCAACATCAGTCTGATAA GCTA;序列四为GTTTCATCAACATCAGTCTGATTAGCTTATCAGACTGATGTTGA;适配体一为ACGGCACGTAGAGCATCACCATGATCCTG;适配体二为CAGGCTACGGCACGTAGAGCATCACCATGATCCTGTTTTTTTTTTTTTTTTTTATACAGATACAATAGATC。
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