[发明专利]一种从荷叶中分离高纯度金丝桃苷的方法

摘要

一种从荷叶中分离高纯度金丝桃苷的方法。涉及一种从天然植物具体是从荷叶中分离高纯度金丝桃苷并同步制取荷叶总黄酮的方法，特别是采用常温弱碱水溶液超声辅助连续动态逆流浸提取代常规醇水热溶剂浸提，配合超滤去杂、纳滤溶剂回收、多组大孔吸附树脂分离技术提取，并分步洗脱收集高纯度金丝桃苷和其它荷叶总黄酮的方法。提供了一种功能因子明确、适合于工业化生产、成本低、纯度高、且环保节能的从荷叶中分离高纯度金丝桃苷的方法。本发明适合荷叶黄酮资源工业化开发利用。

主权项

1.一种从荷叶中分离高纯度金丝桃苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)、粉碎：将洁净鲜荷叶干燥、粉碎，制得荷叶碎片；2)、浸提：2.1)、荷叶碎片常温下浸没在0.07～0.15moL/L碱性水溶液中预浸润12～24小时后得到浸润料和浸润液；2.2)、将浸润料从超声逆流浸取器投料入口端投入，浸润液从残渣出口端补入，料液比为1:20～50，超声波动态逆流浸提槽中连续浸提荷叶有效成分30～50min，得到浸提液和残渣；2.3)、对残渣进行压榨，然后用与残渣体积1:1的清水洗涤1～2次，洗水补入浸提液中得到料液；3)、除杂：3.1)、将料液pH调至中性，静置后，先用0.1～0.2μm的微滤膜去除残留微粒；3.2)、再用截留分子量在2～10万的超滤膜在常温下进行超滤，至料液剩15～25％时，加水透析2～4次，加水量的限度为使超滤透过液中总黄酮浓度为0.8～1.5mg/mL，制得超滤液；4)、上柱：4.1)、大孔树脂聚酰胺树脂湿法装入树脂柱，水洗涤平衡后，将超滤液通入树脂柱，待检测漏出液的黄酮浓度达到初始浓度的12～18％时停止上柱，得吸附饱和的聚酰胺树脂柱；4.2)、对吸附饱和的聚酰胺树脂柱采用2.0～4.0倍树脂体积的pH值为4～6、温度为10～15℃的水进行快速洗涤，去除杂质；5)、梯度洗脱：5.1)、用2.0～4.0倍树脂体积的8～12％体积溶度的乙醇水溶液洗脱步骤4)中聚酰胺树脂柱吸附的黄酮甙类化合物，得组分1；5.2)、接着用2.0～4.0倍树脂体积的20～40％体积溶度的乙醇水溶液洗脱树脂吸附的中等极性的黄酮类黄酮化合物，得组分2；5.3)、再用2.0～4.0倍树脂体积的45～50％体积溶度的乙醇水溶液洗脱，得组分3，该洗脱液弃用；5.4)最后用2.0～4.0倍树脂体积的62～65％体积溶度的乙醇水溶液洗脱树脂中吸附的极性弱的黄酮类化合物，得组分4；6)、再次上柱：6.1)、蒸发掉组分2中的乙醇，补充水分使总黄酮浓度在1.0～2.0mg/mL，上HZ806树脂柱再次吸附，上柱流速为1.5～3BV/h，待检测漏出液的黄酮浓度达到初始浓度的10～20％时停止上柱；用蒸馏水或纯净水10～15℃下对HZ806树脂进行洗脱，除去水溶性杂质，得吸附饱和的HZ806树脂柱；6.2)、对吸附饱和的HZ806树脂柱，后接处理好的直径与之相同的XDA‑6大孔树脂柱，用流速为1.5～3BV/h的70％乙醇进行洗脱，乙醇用量为4～6BV，收集洗脱液得组分5；7)、浓缩、干燥：对组分1、组分4和组分5分别依次采用纳滤膜浓缩和真空浓缩后，进一步进行真空干燥或喷雾干燥制得荷叶总黄酮和金丝桃苷精细粉。