[发明专利]一种猪胚成纤维细胞的制备方法在审
申请号: | 201611188922.5 | 申请日: | 2016-12-21 |
公开(公告)号: | CN106479963A | 公开(公告)日: | 2017-03-08 |
发明(设计)人: | 王乾 | 申请(专利权)人: | 王乾 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 246121 安徽省安庆市怀宁*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明涉及一种猪胚成纤维细胞的制备方法,以严格的步骤来制备猪胚成纤维细胞,本发明的有益成果是本发明扩增了猪胚成纤维细胞,通过完善的实验步骤对整个制备过程进行限定,并严格规定其中的参数,使制备方法的结果更加完善。 | ||
搜索关键词: | 种猪 纤维 细胞 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种猪胚成纤维细胞的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:取38℃孵化至1‑2年的猪胚,碘酒消毒8分钟,酒精脱碘后,无菌操作分离胚体,用无菌的D‑Hank’s液轻轻洗涤8次,加入3~8ml的0.28%胰酶,于37℃的温度下,消化20~30分钟,消化过程中轻轻吹打数次,以使消化后的胚体尽量地分散单个细胞,然后用台盼蓝进行活细胞计数,按照480~500万细胞/瓶的浓度分装于100ml细胞培养瓶中,置于37℃的8%浓度的二氧化碳培养箱中,待细胞长成单层后以备接种,所述猪胚的细胞生长液为含5%犊牛血清、3ul/ml两性霉素、青霉素和链霉素混合而成。
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