[发明专利]一种猪胚成纤维细胞的制备方法在审

专利信息
申请号: 201611188922.5 申请日: 2016-12-21
公开(公告)号: CN106479963A 公开(公告)日: 2017-03-08
发明(设计)人: 王乾 申请(专利权)人: 王乾
主分类号: C12N5/073 分类号: C12N5/073
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 246121 安徽省安庆市怀宁*** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明涉及一种猪胚成纤维细胞的制备方法,以严格的步骤来制备猪胚成纤维细胞,本发明的有益成果是本发明扩增了猪胚成纤维细胞,通过完善的实验步骤对整个制备过程进行限定,并严格规定其中的参数,使制备方法的结果更加完善。
搜索关键词: 种猪 纤维 细胞 制备 方法
【主权项】:
一种猪胚成纤维细胞的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:取38℃孵化至1‑2年的猪胚,碘酒消毒8分钟,酒精脱碘后,无菌操作分离胚体,用无菌的D‑Hank’s液轻轻洗涤8次,加入3~8ml的0.28%胰酶,于37℃的温度下,消化20~30分钟,消化过程中轻轻吹打数次,以使消化后的胚体尽量地分散单个细胞,然后用台盼蓝进行活细胞计数,按照480~500万细胞/瓶的浓度分装于100ml细胞培养瓶中,置于37℃的8%浓度的二氧化碳培养箱中,待细胞长成单层后以备接种,所述猪胚的细胞生长液为含5%犊牛血清、3ul/ml两性霉素、青霉素和链霉素混合而成。
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