[发明专利]一种人源程序性死亡受体hPD-1单克隆抗体有效
申请号: | 201611197005.3 | 申请日: | 2016-12-22 |
公开(公告)号: | CN106749666B | 公开(公告)日: | 2018-12-25 |
发明(设计)人: | 杨娟娟;孟春;吕唯;刘照;吴茂 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | C07K16/28 | 分类号: | C07K16/28;C12N15/13;C12N1/21;C12N15/70;C12P21/02 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊;陈彩芳 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及一种人源程序性死亡受体hPD‑1单克隆抗体的制备方法,属于抗体的制备方法技术领域。包括以下步骤:hPD‑1胞外段重组基因的构建;hPD‑1胞外段蛋白的制备;将制备好的抗原注射到Balb/c小鼠体内;再加强免疫3次后采血,ELISA检测血清效价;取效价达到要求的Balb/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合;杂交瘤细胞的克隆化培养;将克隆化培养、筛选获得的杂交瘤细胞接种于Balb/c小鼠腹腔内,即可获得抗体浓度很高的腹水单抗;利用Protein A填料纯化单克隆单体。本发明的方法制备的hPD‑1的单克隆抗体在免疫组化的结果上具有较强的膜定位和具有高特异性、敏感度高、纯度高的优点。 | ||
搜索关键词: | 制备 单克隆抗体 克隆化培养 杂交瘤细胞 死亡受体 源程序 抗体 制备方法技术 胞外段蛋白 骨髓瘤细胞 加强免疫 免疫组化 血清效价 重组基因 敏感度 脾细胞 抗原 腹水 采血 单抗 腹腔 构建 外段 效价 接种 注射 体内 筛选 融合 | ||
【主权项】:
1.一种人源程序性死亡受体hPD‑1单克隆抗体,其特征在于:所述抗体包括轻链可变区和重链可变区,所述的重链可变区碱基序列如SEQ ID NO.1所示,轻链可变区的碱基序列如SEQ ID NO.3所示。
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