[发明专利]一种核苷酸基金属仿生漆酶

摘要

本发明涉及一种核苷酸基金属仿生漆酶，具体涉及一种用于酚类物质和肾上腺素类化合物检测的核苷酸基金属仿生漆酶，该金属仿生漆酶为Cu²⁺与核苷酸形成的纳米网状配位复合物，该复合物以Cu²⁺为催化中心，以核苷酸为有机骨架，具有类漆酶活性。该金属仿生漆酶具有较高活性，能够多次重复利用，并且稳定性大大优于生物漆酶，能够代替生物漆酶应用于酚胺类物质的检测。该金属仿生酶还能够直接催化氧化肾上腺素类化合物生成显色物质，从而实现对肾上腺素类化合物的检测。应用该金属仿生漆酶检测酚胺类物质及肾上腺素类化合物的方法简便易行且灵敏度较高，在生化检测领域具有较好的应用前景。

主权项

1.一种核苷酸基金属仿生漆酶，其特征在于，为Cu²⁺与核苷酸形成的纳米网状配位复合物，所述复合物以Cu²⁺为催化中心，以核苷酸为有机骨架；所述复合物的制备方法包括如下步骤：1)分别配制可溶性铜盐和可溶性核苷酸溶液；其中，所述可溶性铜盐的浓度为50‑250mmol/L，所述可溶性核苷酸溶液的浓度为5‑25mmol/L；所述可溶性铜盐为硫酸铜、氯化铜或硝酸铜；所述可溶性核苷酸为5’‑鸟嘌呤核苷单磷酸二钠盐及其二磷酸和三磷酸钠盐、5’‑腺嘌呤核苷单磷酸二钠盐及其二磷酸和三磷酸钠盐、5’‑胞嘧啶核苷单磷酸二钠盐及其二磷酸和三磷酸钠盐；2)将步骤1)配制的可溶性铜盐和可溶性核苷酸溶液在常温下混合，静置0.5‑3h，离心得到蓝色沉淀，即所述核苷酸基金属仿生漆酶；其中，离心转速为10000‑12000rpm，时间为5‑10min；配制所述可溶性核苷酸溶液所采用的溶剂为水溶液、HEPES缓冲液或MES缓冲液；所述HEPES缓冲液的浓度为10mmol/L，pH为6.8‑8.0；所述MES缓冲液的浓度为30mmol/L，pH为5.5‑6.8。