[发明专利]L-脯氨酸4-羟化酶有效
| 申请号： | 201611198550.4 | 申请日： | 2016-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN108220259B | 公开（公告）日： | 2021-05-07 |
| 发明（设计）人： | 张翀;李梅;邢新会 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12P13/24 |
| 代理公司： | 北京彩和律师事务所 11688 | 代理人： | 闫桑田 |
| 地址： | 100084*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种L‑脯氨酸4‑羟化酶突变体，以及编码其的DNA、具有该DNA的重组载体，以及生产反式‑(2S,4R)‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的方法。该L‑脯氨酸4‑羟化酶突变体的序列为在SEQ ID No.:3所示的序列中具有如下突变中的一种或多种：91位从组氨酸到谷氨酰胺的突变；228位从缬氨酸到苯丙氨酸的突变；89位从酪氨酸到苯丙氨酸的突变；228位从缬氨酸到丙氨酸的突变；54位从缬氨酸到丙氨酸的突变；53位从苏氨酸到丙氨酸的突变；152位从亮氨酸到谷氨酰胺的突变；165位从天冬氨酸到谷氨酸的突变，以及第266位从苯丙氨酸到亮氨酸的突变；53位从苏氨酸到丙氨酸的突变，以及第272位从缬氨酸到异亮氨酸的突变；5位从苏氨酸到丝氨酸的突变，以及第171位从亮氨酸到谷氨酰胺的突变。 | ||
| 搜索关键词： | 脯氨酸 羟化酶 | ||
【主权项】：
1.一种L‑脯氨酸4‑羟化酶，其序列为在SEQ ID No.:3所示的序列中具有如下(1)～(10)突变中的一种或多种：(1)SEQ ID No.:3中第91位氨基酸从组氨酸到谷氨酰胺的突变(H91Q)；(2)SEQ ID No.:3中第228位氨基酸从缬氨酸到苯丙氨酸的突变(V228F)；(3)SEQ ID No.:3中第89位氨基酸从酪氨酸到苯丙氨酸的突变(Y89F)；(4)SEQ ID No.:3中第228位氨基酸从缬氨酸到丙氨酸的突变(V228A)；(5)SEQ ID No.:3中第54位氨基酸从缬氨酸到丙氨酸的突变(V54A)；(6)SEQ ID No.:3中第53位氨基酸从苏氨酸到丙氨酸的突变(T53A)；(7)SEQ ID No.:3中第152位氨基酸从亮氨酸到谷氨酰胺的突变(L152Q)；(8)SEQ ID No.:3中第165位氨基酸从天冬氨酸到谷氨酸的突变，以及第266位氨基酸从苯丙氨酸到亮氨酸的突变(D165E；F266L)；(9)SEQ ID No.:3中第53位氨基酸苏氨酸到丙氨酸的突变，以及第272位氨基酸从缬氨酸到异亮氨酸的突变(T53A；V272I)；(10)SEQ ID No.:3中第5位氨基酸苏氨酸到丝氨酸的突变，以及第171位氨基酸从亮氨酸到谷氨酰胺的突变(T5S；L171Q)。
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