[发明专利]一种检测军团菌并区分嗜肺军团菌的检测试剂盒在审
| 申请号： | 201611207887.7 | 申请日： | 2016-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN108239672A | 公开（公告）日： | 2018-07-03 |
| 发明（设计）人： | 郭圣明;吴大治;夏懿 | 申请（专利权）人： | 上海星耀医学科技发展有限公司;上海复星医药（集团）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201315 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种检测军团菌并区分嗜肺军团菌的检测试剂盒，利用TaqMan探针多色荧光PCR技术，选择在16S rRNA基因和mip基因序列位点分别设计军团菌特异性的引物探针和嗜肺军团菌特异性引物探针，对引物探针以及扩增体系进行优化验证，确定扩增效果最优的引物探针序列、引物探针的最优组合、最优扩增体系组分浓度以及试验运行程序，检测过程仅凭不同荧光标记的探针检测就能检测出军团菌并对其中的嗜肺军团菌进行区分；同时本发明还引入了人工构建的内参对照，用于避免检测结果的假阴性。本发明的检测结果稳定可靠，试剂盒使用方便，检测灵敏度高，适合于环境、疾控以及临床中军团菌和嗜肺军团菌的快速检测。 | ||
| 搜索关键词： | 嗜肺军团菌 军团菌 引物探针 检测结果 检测试剂 扩增体系 种检测 探针 检测灵敏度 试剂盒使用 特异性引物 多色荧光 快速检测 扩增效果 内参对照 试验运行 探针检测 荧光标记 中军团菌 最优组合 对引物 假阴性 检测 构建 位点 验证 基因 引入 优化 | ||
【主权项】：
1.本发明为一种检测军团菌并区分嗜肺军团菌的检测试剂盒，其特征在于，基于军团菌靶序列SEQ ID No.1和SEQ ID No.2设计多对引物探针，并对所设计的引物探针进行试验验证、浓度优化，同时对扩增体系中的重要组分及扩增程序进行优化，确定扩增效果最优的引物探针序列、最优扩增体系以及试验运行程序，通过TaqMan探针多波长荧光PCR技术单管扩增检测痰液及肺泡灌洗液中军团菌，并对其中的嗜肺军团菌进行区分鉴别。
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