[发明专利]一种动物细胞胞内能量代谢物提取及含量测定方法在审
| 申请号： | 201611208371.4 | 申请日： | 2016-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN108240924A | 公开（公告）日： | 2018-07-03 |
| 发明（设计）人： | 谭文松;赵亮;刘旭平;范里;王晨;汪嘉琪 | 申请（专利权）人： | 上海倍谙基生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N27/447 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 徐嘉慧;崔佳佳 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种动物细胞胞内能量代谢物提取及含量测定的方法，包括步骤：制备待测样品、取包括NADH、NAD+、NADPH、NADP+、ATP、ADP、AMP、或其组合的标准品溶于水中，制得标准溶液、将待测样品与磷酸钾基质液混合，调节pH为5.0‑7.0，然后加入至含硼酸盐缓冲液的毛细管中，进行电泳分离。本发明的提取及检测方法操作简单、准确、重复性好，能够较好地同时检测动物细胞胞内7种能量代谢物。 | ||
| 搜索关键词： | 动物细胞 能量代谢 待测样品 含量测定 硼酸盐缓冲液 标准溶液 电泳分离 标准品 基质液 磷酸钾 毛细管 检测 水中 制备 | ||
【主权项】：
1.一种测定动物细胞胞内能量代谢物含量的方法，所述细胞胞内能量代谢物选自下组：NADH、NAD+、NADPH、NADP+、ATP、ADP、AMP、或其组合，所述方法包括步骤：(a)制备待测样品(1)取细胞悬液，与生理盐水混合均匀，离心，去除上清液，得到细胞沉淀物I，其中所述细胞悬液和生理盐水的体积比为1:1:‑1:100；(2)将步骤(1)所得的细胞沉淀物I与乙腈提取液混合均匀，冰浴，离心，去除上清液，得到细胞沉淀物II；(3)将步骤(2)所得的细胞沉淀物II浓缩至干燥，制得所述待测样品；(b)取包括NADH、NAD+、NADPH、NADP+、ATP、ADP、AMP、或其组合的标准品溶于水中，制得标准溶液；(c)将步骤(3)所述待测样品与磷酸钾基质液混合，调节pH为5.0‑7.0，然后加入至含硼酸盐缓冲液的毛细管中，进行电泳分离；和(d)任选地，计算待测样品中能量代谢物的浓度。
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