[发明专利]一种缺氧环境下细胞快速复氧的方法

摘要

本发明涉及一种缺氧环境中细胞快速复氧的方法，包括氧载体制备、细胞培养和细胞检测吸出多余的氧载体培养基，加入100微升，10%的2‑(2‑甲氧基‑4‑硝基苯基)‑3‑(4‑硝基苯基)‑5‑(2,4‑二磺酸苯)‑2H‑四唑单钠盐（CCK‑8）试剂，在37℃恒温培养箱中孵育2‑4小时后，用酶标仪检测其吸光度，测定细胞的活性。载氧体能富集大量的氧气，作为氧气的供体，在空气氧气不足的情况下，能为细胞提供氧气。本发明不添加外来物质，生物安全性高、毒性小，方法简单，可操作性强。

主权项

一种缺氧环境下细胞快速复氧的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1）氧载体制备：按重量份计，将10份氟碳化合物溶解于100份乙醇中，同时加入1‑10份液态烷烃和环醚等为高溶解氧物质，充分搅拌混合10分钟，配制成氧载体的乙醇溶液；（2）细胞培养：取正常贴壁细胞放置于不同氧浓度的三气培养箱中，培养一定时间后，吸出原有的培养基，换上含有氧载体的培养基，加入表面活性剂，在正常氧浓度下培养若干小时复氧；（3）细胞检测：吸出多余的氧载体培养基，加入100微升，10%的2‑(2‑甲氧基‑4‑硝基苯基)‑3‑(4‑硝基苯基)‑5‑(2,4‑二磺酸苯)‑2H‑四唑单钠盐（CCK‑8）试剂，在37℃恒温培养箱中孵育2‑4小时后，用酶标仪检测其吸光度，测定细胞的活性。