[发明专利]一种发酵生产重组人白介素-12的方法有效
申请号: | 201611232173.1 | 申请日: | 2016-12-28 |
公开(公告)号: | CN108251375B | 公开(公告)日: | 2021-05-07 |
发明(设计)人: | 郑彬彬;卢世香;黄冰;姜会春;赵毅 | 申请(专利权)人: | 康立泰药业有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12P21/02 |
代理公司: | 青岛清泰联信知识产权代理有限公司 37256 | 代理人: | 张洁 |
地址: | 266001 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了一种发酵生产重组人白介素‑12的方法,属于生物制品生产工艺领域,其包括,1)利用无血清培养基将含有重组人白介素‑12表达基因的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)复苏活化,并放大培养获得种子细胞;2)待种子细胞正常生长后,将种子细胞进行适应性扩大培养;3)将所得的种子细胞接种到生物反应器中进行培养;4)培养过程中定期添加无血清补料培养基和谷氨酰胺,并监测细胞生长情况;5)待细胞存活率低于80%时,结束培养收获细胞。本发明的方法可以高量的表达重组人白介素‑12,且易于下游纯化。 | ||
搜索关键词: | 一种 发酵 生产 重组 白介素 12 方法 | ||
【主权项】:
1.一种发酵生产重组人白介素‑12的方法,其包括,1)利用无血清培养基将含有重组人白介素‑12表达基因的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)复苏活化,并放大培养获得种子细胞;2)待种子细胞正常生长后,将所述种子细胞进行适应性扩大培养;3)将所得的所述种子细胞接种到生物反应器中进行培养,培养条件为:转速100‑120rmp、pH为6.8‑7.3、溶氧为30%‑50%;4)培养过程中定期添加无血清补料培养基和谷氨酰胺,并监测细胞生长情况;5)待所述细胞存活率低于80%时,结束培养收获细胞。
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