[发明专利]对FAP-α酶、还原环境双敏感的粒径收缩型的肿瘤渗透性纳米系统的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及对FAP‑α酶、还原环境双敏感的粒径收缩型的肿瘤渗透性纳米系统的制备方法及其应用，可有效解决传统给药系统中靶向性差、毒副作用大、功能单一、渗透性差、难以克服肿瘤微环境生物屏障的问题，其解决的技术方案是，阿霉素通过二硫键作为连接臂与聚酰胺胺相连形成还原敏感型纳米粒，然后将此纳米粒通过对FAP‑α敏感的多肽连接臂相连形成对FAP‑α、还原环境双敏感的粒径收缩型的肿瘤渗透性治疗纳米系统，本发明具有良好的生物相容性、酶和还原环境双敏感性、高渗透性以及能够有效克服肿瘤微环境生物屏障等优点，是肿瘤治疗中药物制剂上的创新。

主权项

1.一种对FAP-α酶、还原环境双敏感的粒径收缩型的肿瘤渗透性纳米系统的制备方法，其特征在于，阿霉素通过二硫键作为连接臂与聚酰胺胺相连形成还原敏感型纳米粒，然后将此纳米粒通过对FAP-α敏感的多肽连接臂相连形成对FAP-α、还原环境双敏感的粒径收缩型的肿瘤渗透性纳米系统，所述的二硫键为3，3’-二硫代二丙酸或2，2’-二硫代二乙酸，多肽连接臂为苏氨酸-丝氨酸-甘氨酸-脯氨酸-天冬酰胺-谷氨酰胺或AC-天冬氨酸-丙氨酸-苏氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸或丙氨酸-丝氨酸-甘氨酸-脯氨酸-天冬酰胺-谷氨酰胺或苏氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸；具体包括以下步骤：/n（1）合成还原敏感型的纳米粒：/n①称取作为连接臂的二硫键3，3’-二硫代二丙酸或2，2’-二硫代二乙酸10mg-2g，分别加入2.0~15.0ml乙酰氯，置于烧瓶中，在65℃油浴下回流2~6h，将反应物进行浓缩后加入3~4倍预冷的乙醚，冷却析晶，真空干燥，得3，3’-二硫代二丙酸酐或2，2’-二硫代二乙酸酐；/n②称取0.01~1.0mmol阿霉素、0.01~1.0mmol4-二甲氨基吡啶和0.01~1.0mmol步骤①中制得的酸酐分别溶解于0.5~15.0ml反应溶剂A中，将阿霉素和4-二甲氨基吡啶溶液混合，加入20~200μl三乙胺，向上述溶液中加入酸酐溶液，在25~45℃下避光反应8~24h，反应停止后加入3~4倍预冷的乙醚，冷却析晶，真空干燥，得羧基化的阿霉素；/n③称取羧基化的阿霉素20~100mg、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺100~250mg和羟基琥珀酰亚胺60~180mg分别溶解于5~25mL反应溶剂A中，先将羧基化的阿霉素和1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺溶液混合，反应0.5~3h，再加入羟基琥珀酰亚胺溶液，反应0.5~4h，得活化的羧基化阿霉素，取聚酰胺胺10~150mg溶解于3~12mL反应溶剂A中，加10~200μl三乙胺，再将活化的羧基化阿霉素和聚酰胺胺溶液混合，在20~45℃下氮气保护反应6~26h，反应结束后用截留分子量3500的透析袋透析2天，透析液为超纯水，每3~6小时换一次水，冷冻干燥，得还原敏感型的纳米粒；/n所述的反应溶剂A为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺的一种或两种的混合物；/n（2）合成对FAP-α、还原环境双敏感的纳米粒：/n称取作为连接臂的多肽链2~100mg、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺 20~200mg和羟基琥珀酰亚胺 15~180mg分别溶解于2~20mL反应溶剂B中，然后将多肽连接臂和1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺溶液混合，反应0.5~2.5h，再加入羟基琥珀酰亚胺溶液，反应0.5~3.5h，得活化的多肽连接臂，取负载了阿霉素的还原敏感型的纳米粒10~200mg溶解于5~25mL反应溶剂B中，再将活化的多肽连接臂和上述纳米粒溶液混合，在20~40℃下氮气保护8~25h，反应结束后用截留分子量3500~8000的透析袋透析2天，透析液为超纯水，每3~6h换一次水，冷冻干燥，得FAP-α、还原环境双敏感的纳米粒；即对FAP-α酶、还原环境双敏感的粒径收缩型的肿瘤渗透性纳米系统；/n所述的反应溶剂B为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺的一种或两种的混合物。/n