[发明专利]一种基于阿魏酸含量评定水稻化感作用诱导效率的方法

摘要

本发明公开了一种基于阿魏酸含量评定水稻化感作用诱导效率的方法，其是先将水稻幼苗经系列浓度稗草种植液诱导后，分别测定所得水稻叶片浸提液对莴苣根长的抑制率与叶片浸提液中阿魏酸含量，再根据两者关系建立回归方程，最后利用所得回归方程判定水稻化感作用诱导效率的强弱。本发明在研究发现化感水稻叶片浸提液对莴苣根长抑制率与其中阿魏酸的含量具有一定相关性的基础上，通过进一步建立两者关系的回归方程式，以实现通过对叶片浸提液中阿魏酸含量的测定而达到快速评价水稻化感作用诱导效率的目的，其可有效解决目前采用生测法评定水稻化感作用诱导效率费时费力、结果不一致的问题，具有良好推广前景，国内外尚无相关研究报道。

主权项

一种基于阿魏酸含量评定水稻化感作用诱导效率的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）稗草种植液诱导：将化感水稻PI312777的幼苗转移到装有5L霍格兰全营养液的塑料盆上分别进行培养，每盆种50株水稻，间距4cm×5cm；待水稻长至3叶期时，倒去营养液，分别加入5L含不同体积稗草种植液的霍格兰全营养液，诱导培养2d后收集各组水稻叶片；2）叶片浸提液的制备：将所得水稻叶片剪成1cm的小段，按1g叶片加10mL蒸馏水，20℃浸提24h，经0.45μm滤膜过滤，得叶片浸提液；3）阿魏酸含量的检测：取叶片浸提液20mL，用磷酸调节pH到4.00，然后加入1.6g NaCl，溶解后得叶片提取液；将叶片提取液加入到预处理好的Cleanert PEP固相萃取小柱中，当溶液流完后加入2mL蒸馏水冲洗，然后加入6mL甲醇洗脱，并收集洗脱液，所得洗脱液冷冻干燥后，采用HPLC法测定其中阿魏酸含量；4）叶片浸提液对莴苣根长抑制率的测定：另取4mL叶片浸提液和1mL蒸馏水混合后加入到垫有滤纸的组培瓶中，并将5颗刚冒白的莴苣种子播在滤纸上，盖好盖子，于25℃培养箱中培养3d后测定莴苣的根长，并计算根长抑制率；5）回归方程的制备：根据所测定阿魏酸含量与根长抑制率的关系建立回归方程；6）水稻化感作用诱导效率的评定：按步骤2）、3）制备待测水稻样品叶片浸提液，并测定其中阿魏酸含量，然后根据所得回归方程判定待测水稻化感作用诱导效率的强弱。