[发明专利]一种具有保肝护肝功能的促肝细胞生长素制备方法在审
| 申请号： | 201611240558.2 | 申请日： | 2016-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN106632652A | 公开（公告）日： | 2017-05-10 |
| 发明（设计）人： | 张奇;赵兵;赵亮亮 | 申请（专利权）人： | 中驭（北京）生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/475 | 分类号： | C07K14/475;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;C07K1/14 |
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| 地址： | 100101 北京市朝*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种具有保肝护肝功能的低分子量猪胎肝促肝细胞生长素制备方法，属于功能性提取加工领域。采用热变性酶解法，结合膜过滤、凝胶层析法，从猪胎肝中提取纯化低分子量促肝细胞生长素，其中8kDa促肝细胞生长素在1.5μg/mL～15μg/mL时可有效促进HpG2的增殖，在浓度大于150μg/mL时，可抑制HpG2的生长。本发明方法制备的小肽具有双向调节肝细胞功能，具有保肝护肝功效。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 具有 保肝护 肝功能 肝细胞 生长素 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种具有保肝护肝功能的低分子量猪胎肝促肝细胞生长素制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将健康乳猪肝筋膜去除，剪碎至1‑1.5cm3；以猪胎肝∶生理盐水＝2∶3比例加入0.85％生理盐水，充分破碎、匀浆；(2)将(1)于95℃热变性/10～90min；高速离心后，收集上清液，测蛋白浓度，加入总蛋白1/40～1/100的胰蛋白酶，pH7.0‑pH8.2，37℃水解0.5～2h，离心收集上清液；(3)以10kD超滤膜过滤，收集超滤液，75％终浓度丙酮沉淀，去离子水复溶后Sephadex G‑50凝胶柱分离纯化，收集蛋白峰；(4)真空冷冻干燥(3)，获得低分子量猪胎肝促肝细胞生长素。
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