[发明专利]Sortase A介导的(S)-羰基还原酶寡聚体高效催化(S)-苯基乙二醇的合成有效
| 申请号： | 201611250627.8 | 申请日： | 2016-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN106636019B | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 张荣珍;徐岩 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N9/04;C12N9/64;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了Sortase A介导的(S)‑羰基还原酶寡聚体高效催化(S)‑苯基乙二醇的合成，属于生物催化不对称转化术领域。本发明将引入SrtA识别序列的(S)‑羰基还原酶进行纯化，同时纯化得到SrtA纯酶，利用SrtA介导的连接反应，得到(S)‑羰基还原酶寡聚体；以分离得到的寡聚体为催化剂，2‑羟基苯乙酮为底物，反应时间3小时，产物(S)‑苯基乙二醇光学纯度达到100％e.e.，产率为99％；相比于原始酶，寡聚体的酶活提高了6倍，催化转化(S)‑苯基乙二醇的时间缩短了16倍，热稳定性提高了10℃。本发明利用SrtA介导的蛋白质连接解决了羰基还原酶催化效率低，热稳定性差的缺陷，为高效制备(S)‑苯基乙二醇提供了有效途径，为蛋白质改造领域提供了新的方向。 | ||
| 搜索关键词： | 苯基乙二醇 羰基还原酶 寡聚体 介导 热稳定性 不对称转化 蛋白质改造 羟基苯乙酮 催化效率 催化转化 高效制备 光学纯度 连接反应 生物催化 时间缩短 有效途径 原始酶 产率 纯酶 底物 酶活 催化剂 催化 蛋白质 合成 引入 | ||
【主权项】：
1.一种氧化还原酶寡聚体，其特征在于，所述氧化还原酶寡聚体是先制备在C末端添加了sortase A识别序列的氧化还原酶，然后使该氧化还原酶发生通过转肽酶SrtA介导的连接反应而得到氧化还原酶寡聚体；所述氧化还原酶为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的(S)-羰基还原酶；所述sortase A识别序列为LPETG。/n
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