[发明专利]一种同时检测柑橘黄化脉明病毒和衰退病毒的多重RT-PCR方法及其应用有效
| 申请号： | 201611264705.X | 申请日： | 2016-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN106480231B | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 刘金香;赵恒燕;周常勇;陈洪明 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 11275 北京同恒源知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王贵君 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种同时检测柑橘黄化脉明病毒和柑橘衰退病毒2种柑橘病毒的多重RT‑PCR方法。该方法选用CYCVC和CTV 2种病原外壳蛋白保守序列及内参基因的特异性引物，对影响多重PCR的Mg | ||
| 搜索关键词： | 一种 同时 检测 柑橘 黄化 病毒 衰退 多重 rt pcr 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种同时检测柑橘黄化脉明病毒和衰退病毒的多重RT-PCR方法，其特征在于：提取待检叶片样品的总核酸为模板，以SEQ ID NO.1~ SEQ ID NO.6所示序列为引物进行多重RT-PCR扩增，其扩增产物用琼脂糖凝胶电泳判定结果，所述多重RT-PCR扩增的退火温度为62℃~63℃；多重RT-PCR扩增反应程序为：50℃ 反转录30 min，94℃预变性4 min，94℃ 变性30 s，62℃~63℃退火50 s，72℃延伸1 min，35个循环，72℃ 10 min，10℃终止反应；多重PCR扩增总反应体系中，Mg
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