[发明专利]用于从包含污染宿主细胞蛋白质的材料纯化重组人α-半乳糖苷酶A的方法

摘要

公开了用于以大规模产生高纯度的重组人α‑半乳糖苷酶A(rhα‑Gal A)的方法。所述方法包括如下步骤：(a)在无血清培养基中培养产生rhα‑Gal A的哺乳动物细胞，(b)收集培养物上清液，(c)使所述培养物上清液经过阴离子‑交换柱色谱，(d)经过疏水柱色谱，(e)经过采用对磷酸基团具有亲和性的材料作为固相的柱色谱，(f)经过阳离子‑交换柱色谱，(g)经过染料‑亲和柱色谱，和(h)经过凝胶过滤柱色谱，以该顺序进行。

主权项

用于产生重组人α‑Gal A的方法，包括如下步骤：(a)在无血清培养基中培养产生重组人α‑Gal A的哺乳动物细胞，以让其在该培养基中分泌重组人α‑Gal A，(b)通过从在上述步骤(a)中获得的培养物去除细胞来收集培养物上清液，(c)使在上述步骤(b)中收集的培养物上清液经过阴离子‑交换柱色谱，以收集重组人α‑Gal A‑活性分级分离部分，(d)使在上述步骤(c)中收集的该分级分离部分经过疏水柱色谱，以收集重组人α‑Gal A‑活性分级分离部分，(e)使在上述步骤(d)中收集的该分级分离部分经过采用对磷酸基团具有亲和性的材料作为固相的柱色谱，以收集重组人α‑Gal A‑活性分级分离部分，(f)使在上述步骤(e)中收集的该分级分离部分经过阳离子‑交换柱色谱，以收集重组人α‑Gal A‑活性分级分离部分，(g)使在上述步骤(f)中收集的该分级分离部分经过染料‑亲和柱色谱，以收集重组人α‑Gal A‑活性分级分离部分，和(h)使在上述步骤(g)中收集的该分级分离部分经过凝胶过滤柱色谱，以收集重组人α‑Gal A‑活性分级分离部分，以所述顺序进行。