[发明专利]用于丝状真菌宿主细胞的CRISPR-CAS系统

摘要

本发明涉及分子生物学和细胞生物学的领域。更具体地，本发明涉及一种用于丝状真菌宿主细胞的CRISPR‑CAS系统。

主权项

1.一种非天然存在或工程化的组合物，其包含含有向导多核苷酸和Cas蛋白的CRISPR‑Cas系统的来源，其中所述向导多核苷酸包含基本上为宿主细胞中靶多核苷酸的反向互补体的向导序列，并且所述向导多核苷酸能够引导所述Cas蛋白结合在所述宿主细胞中的靶多核苷酸处以形成CRISPR‑Cas复合物，其中所述向导序列基本上为所述宿主细胞的基因组中的5’‑(N)yPAM‑3’多核苷酸序列靶标的(N)y部分的反向互补体，其中y为8‑30的整数，其中PAM为前间区序列邻近基序，其中所述宿主细胞为真核细胞，所述真核细胞是丝状真菌，优选Aspergillus、Penicillium、Rasamsonia或Mortierella，并且其中PAM优选为选自以下的序列：5’‑XGG‑3’、5’‑XGGXG‑3’、5’‑XXAGAAW‑3’、5’‑XXXXGATT‑3’、5’‑XXAGAA‑3’、5’‑XAAAAC‑3’，其中X可以为任何核苷酸或其类似物，优选X可以为任何核苷酸；并且W为A或T。