[发明专利]纯化双特异性抗体的方法

摘要

本发明涉及从单特异性抗体的混合物中纯化双特异性抗体，所述双特异性抗体携带针对免疫球蛋白分子的每个结合位点的不同特异性。双特异性抗体由单一重链和两条不同的轻链组成，所述轻链一条含有κ恒定域并且另一条含有λ恒定域。本发明具体而言涉及从包含具有两条κ轻链或其部分的单特异性抗体和具有两条λ轻链或其部分的单特异性抗体的混合物中分离这些双特异性抗体。本发明还提供有效纯化这些双特异性抗体的方法。

主权项

一种从抗体的混合物中纯化双特异性抗体的方法，所述方法包括以下步骤：(a) 提供包含以下的混合抗体组合物：(i)至少一种双特异性抗体，其具有每个结合位点中不同的特异性以及两拷贝的单一重链多肽、具有κ恒定区的第一轻链和具有λ恒定区的第二轻链(κλ‑体)；(ii)至少一种单特异性抗体，其具有两条λ轻链或其部分(λ单‑Ab)；以及(iii)至少一种单特异性抗体，其具有两条κ轻链或其部分(κ单‑Ab)；(b) 提供分离工具；(c) 在允许与所述κ单‑Ab和所述λ单‑Ab结合至所述分离工具相比所述κλ体差异性结合至所述分离工具的条件下，使所述分离工具与所述混合抗体组合物接触；以及(d) 在允许与从所述分离工具上脱离κ单‑Ab和所述λ单‑Ab相比从所述分离工具上优先脱离所述κλ‑体的条件下，从所述分离工具上洗脱所述κλ‑体、所述κ单‑Ab和所述λ单‑Ab。