[发明专利]FKPA的纯化及其用于生产重组多肽的用途在审
| 申请号： | 201680061356.3 | 申请日： | 2016-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN108473558A | 公开（公告）日： | 2018-08-31 |
| 发明（设计）人： | C·B·方;A·拉迪瓦拉;P·A·麦凯 | 申请（专利权）人： | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/06 | 分类号： | C07K16/06;C07K1/16;C07K1/18;C07K1/22;C07K16/12;C07K14/245 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 陈迎春;黄革生 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | 本发明提供了以极高的纯度水平生产FKBP型肽基脯氨酰基顺反异构酶(FkpA)多肽的方法。还提供了超纯FkpA及其使用方法，例如用于免疫测定法以显示从细菌中产生的生物制剂中去除FkpA。另外，本发明提供了纯化过表达一种或多种分子伴侣的细菌中产生的多肽(例如多特异性抗体)的方法。方法包括亲和层析法、混合模式层析法和疏水相互作用层析法。在一些方面，本发明提供了基本上不含产物特异性杂质的多肽(例如多特异性抗体)组合物。 | ||
| 搜索关键词： | 多肽 多特异性抗体 层析法 细菌 肽基脯氨酰基顺反异构酶 免疫测定法 亲和层析法 纯度水平 分子伴侣 混合模式 生产重组 生物制剂 疏水 去除 生产 | ||
【主权项】：
1.一种从包含FkpA多肽的细胞裂解物中纯化FkpA多肽的方法，所述方法包括a)通过离心澄清细胞裂解物，b)将包含FkpA多肽的澄清的细胞裂解物施加到阳离子交换层析材料，c)从阳离子交换层析材料洗脱FkpA多肽以产生包含FkpA多肽的阳离子交换洗脱液，d)将包含FkpA多肽的阳离子交换洗脱液施加到疏水相互作用层析法(HIC)材料，e)从HIC材料洗脱FkpA多肽以产生HIC洗脱液，f)将包含FkpA多肽的HIC洗脱液施加到尺寸排阻层析法，g)从尺寸排阻层析法中洗脱FkpA多肽。
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