[发明专利]稀有细胞的无离心机分离和检测

摘要

公开了用于分离流体样品中的目标实体的添加性的技术，包括直接稀释方法和直接孵育方法。在一些实施方式中，将一定体积的稀释剂加入到流体样品中以产生第一混合物。加入的稀释剂的体积可以足以获得低于所述流体样品的粘度的特定粘度的第一混合物。向所述第一混合物中加入大量缀合有结合部分的磁珠以产生第二混合物。将所述第二混合物孵育一段时间，该时间足以使所述缀合有结合部分的磁珠结合所述第二混合物中的稀有目标实体。将所述第二混合物的一部分注入流体室。施加磁力以将所述第二混合物中的磁化稀有目标实体吸引到所述流体室内的分离表面。

主权项

1.用于分离流体样品中的目标实体的添加性的直接稀释方法，所述方法包括以下述顺序进行的下述步骤：向所述流体样品中加入所述流体样品的体积的至少0.5倍体积的稀释剂以产生第一混合物，其中所述稀释剂的体积足以获得低于所述流体样品的粘度的特定粘度的所述第一混合物；向所述第一混合物中加入大量缀合有结合部分的磁珠以产生第二混合物，其中所述缀合有结合部分的磁珠中的结合部分能够特异性结合所述目标实体上表达的一种或多种配体，并且其中加入到所述第一混合物中的缀合有结合部分的磁珠的数量足以使所述目标实体磁化；将所述第二混合物孵育一段时间，所述时间为至少5分钟至120分钟并且足以使所述缀合有结合部分的磁珠结合所述第二混合物中的目标实体，其中所述第二混合物的粘度基本上与所述第一混合物的特定粘度相同，并且其中所述第二混合物的粘度足够低以抑制所述缀合有结合部分的磁珠与所述流体样品中的非目标实体的非特异性结合；使所述第二混合物的一部分以大于1.0mL/分钟的流速流入流体室；以及施加磁力以将所述第二混合物中的磁化的稀有目标实体吸引到所述流体室内的分离表面，从而以添加性的方法分离稀有目标实体而不用去除最初流体样品的任何部分。